模拟毫针机械刺激诱导成纤维细胞压力信号生物转化作用与针刺效应的研究

论文题目: 模拟毫针机械刺激诱导成纤维细胞压力信号生物转化作用与针刺效应的研究

论文类型: 博士论文

论文专业: 针灸推拿学

作者: 陈波

导师: 罗永芬

关键词: 针刺,机械刺激,压力信号,穴位,结缔组织,成纤维细胞,生物信号,接受刺激,防治疾病

文献来源: 成都中医药大学

发表年度: 2005

论文摘要: 目的:探讨机械刺激对成纤维细胞的压力信号生物转化作用,为腧穴“接受刺激,防治疾病”的现代医学生物学机制提供理论与实验依据。 方法:对体外培养的成纤维细胞实施压力刺激后,观察细胞形态学变化,检测细胞胞外前列腺素E2（PGE2）、一氧化氮（NO）、白细胞介素-6（IL-6）释放量的变化,胞内IL-6表达和蛋白合成的变化,并通过流式细胞仪所测细胞DNA含量,计算细胞增殖指数（PI）的变化,分析胞内蛋白含量与细胞PI的相关关系。 结果:①实验中所采取的压力刺激强度未对成纤维细胞的细胞形态产生明显影响;②压力刺激促进了成纤维细胞PGE2和NO释放的显著性增加:③压力刺激促进了成纤维细胞胞内蛋白合成的显著性增加,而对细胞PI的变化无显著性影响,且两者无显著性相关关系;④压力刺激既促进了IL-6胞内合成表达的上调,又促进了IL-6胞外释放的显著性增加。 结论:①针刺治疗对穴位的有效刺激在本质上是机械力的作用,而穴位以结缔组织为基础框架,由多种组织构成;模拟毫针的机械压力刺激能够诱导基础框架组织的主要细胞群体——成纤维细胞将压力信号转化为生物化学信号,说明穴位能够通过与穴位相关的非神经组织细胞直接感受刺激,从而将机械信号直接转换为生物信号。其信号的转化过程,可能是腧穴“接受刺激”的基本现代

论文目录:

缩略词表

中文摘要

Abstracts

1 引言

2 实验研究

2.1 材料

2.1.1 细胞系及主要培养用试剂

2.1.2 主要检测试剂及试剂盒

2.1.3 主要实验器材

2.2 细胞培养

2.2.1 成纤维细胞的复苏

2.2.2 成纤维细胞的培养及传代扩增

2.2.3 正常成纤维细胞系鉴定

2.3 细胞力学加载实验

2.3.1 气压传导压力加载装置

2.3.2 成纤维细胞在6孔板上的接种培养及加力前处理

2.3.3 成纤维细胞在盖玻片上的细胞爬片、接种培养及加力前处理

2.3.4 实验设计及分组

2.4 指标检测

2.4.1 压力刺激对成纤维细胞排列及形态变化的影响

2.4.2 前列腺素E_2(PGE_2)测定

2.4.3 一氧化氮(NO)测定

2.4.4 成纤维细胞增殖活性(PI)测定

2.4.5 成纤维细胞胞内蛋白定量

2.4.6 成纤维细胞胞内白细胞介素-6(IL-6)表达检测

2.4.7 成纤维细胞胞外释放IL-6测定

2.5 结果观察及统计学处理

3 结果

3.1 压力刺激对成纤维细胞排列及形态变化的影响

3.2 压力对纤维细胞PGE_2合成释放变化的影响

3.3 压力对纤维细胞NO合成释放的影响

3.4 压力刺激对成纤维细胞增殖动力学的影响

3.5 压力刺激对成纤维细胞胞内蛋白合成的影响

3.6 压力刺激对成纤维细胞PI与蛋白合成影响的相关分析

3.7 压力刺激对成纤维细胞IL-6表达的影响

3.8 压力刺激对成纤维细胞释放IL-6变化的影响

4 讨论

4.1 毫针针刺作用与机理的古代研究及分析

4.2 毫针作用本质的现代物理学分析及细胞力学实验方法

4.2.1 毫针作用本质的现代物理学分析

4.2.2 细胞力学实验方法的选择

4.3 腧穴经络及其物质基础研究

4.3.1 腧穴经络及其物质基础

4.3.2 既往研究中存在的问题及本次课题设计的中心目的

4.3.3 腧穴结缔组织成纤维细胞的细胞生物学与腧穴学意义

4.4 机械信号生物转化作用与机制的现代研究

4.4.1 机械信号生物转化作用的研究

4.4.2 机械信号生物转化机制的研究

4.5 压力刺激对成纤维细胞前列腺素(PGs)及PGE_2合成释放的影响及其针灸学意义

4.5.1 PGs及PGE_2的合成

4.5.2 PGs及PGE_2信号传导作用

4.5.3 PGs及PGE_2的主要生物学作用

4.5.4 压力刺激对成纤维细胞PGE_2合成释放的影响

4.5.5 压力刺激对成纤维细胞PGE_2合成释放影响的针灸学意义

4.6 压力刺激对成纤维细胞NO合成释放的影响及其针灸学意义

4.6.1 NO的生物合成

4.6.2 NO的信号传导作用

4.6.3 NO的生物学作用

4.6.4 压力刺激对成纤维细胞NO合成释放的影响

4.6.5 压力刺激对成纤维细胞NO合成释放影响的针灸学意义

4.7 压力刺激对成纤维细胞的细胞周期与蛋白合成的影响及针灸学意义

4.7.1 细胞周期与蛋白合成

4.7.2 压力刺激对成纤维细胞的细胞周期与蛋白合成影响的综合分析

4.7.3 压力刺激对成纤维细胞的细胞周期与蛋白合成影响的针灸学意义

4.8 压力刺激对成纤维细胞IL-6合成表达与释放的影响及其针灸学意义

4.8.1 细胞因子

4.8.2 IL-6的生物学作用

4.8.3 压力刺激对成纤维细胞IL-6合成表达与释放的影响

4.8.4 压力刺激对成纤维细胞IL-6合成表达与释放影响的针灸学意义

5 结论

6 问题与展望

致谢

参考文献

附录1 力学敏感细胞的研究概况及述评(综述)

附录2 图像资料

附件1 公开发表的学术论文、专著及科研成果

附件2 声明

发布时间: 2005-09-20

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