方则剑
（湖北省黄石市河口卫生院湖北黄石435001）
【摘要】目的：探索糖尿病肾病中医证型与白介素-10关系，为糖尿病肾病中医治法提供临尿依据。方法：以证候问卷量化表86例已确诊糖尿病肾病患者划分中医证型，同时取外周血，运用酶联免疫法定量检测白介素-10。结果：阴虚燥热证组血白介素-10浓度明显高于其它组，与气阴两虚证组、脾肾气虚证组对比差异无统计学意义(P>0.05)，主证中阴阳两虚证最低，与阴虚燥热证组、气阴两虚证组对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论：糖尿病肾病的中医本虚证型可能与白介素-10存在一定相关性。
【关键词】糖尿病肾病；白介素-10；中医证型
【中图分类号】R587.1【文献标识码】B【文章编号】1003-5028（2015）5-0157-02
糖尿病肾病是糖尿病的常见并发症，糖尿病的主要死亡原因之一。DN是一种由多种因素综合作用而发生的慢性疾病，可能致病因素包括糖代谢紊乱、肾脏血流动力学改变、免疫细胞因子异常及遗传背景等[1]。本文尝试探索DN患者中医证型与白介素-10的关系，以期为中西医结合治疗DN寻找新的切入点。
1资料与方法
1.1临床资料：观察组(DN患者):2013年9月至2014年3月在湖北省黄石市中医院门诊及住院己确诊为糖尿病肾病患者。患者分组标准:糖尿病肾病无蛋白尿组(Upro/Ucr<30mg/g)、糖尿病肾病少量蛋白尿组(30mg/g<Upro/Ucr}300mg/g)、糖尿病肾病大量蛋白尿组(300mg/g<Upro/Ucr)、糖尿病肾病肾功能不全组各30例。对照组(健康组):选择同期来上述医院体检的年龄、性别与观察组相匹配的30名健康体检者(所有人员均无心脑血管疾病，无肝、肾疾病，血压、血脂以及心电图均正常)。
1.2纳入和排除标准
1.2.1纳入标准:2型糖尿病的诊断采用1999年世界卫生组织
WHO诊断标准;DN的诊断采用Mogenson标准。符合以上糖尿病诊断标准，DN的诊断分期为Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ期的患者即可纳入研究。
1.2.2排除标准:①原发或其它继发肾脏疾病;②其它内分泌疾病;③恶性肿瘤;④自身免疫性疾病;⑤2周内糖尿病各种急性并发症;)2个月内使用过免疫调节药物。符合以上一项者即排除研究
2方法
2.1中医证候分型:根据《中药新药临床研究指导原则》中糖尿病和慢性肾功能衰竭的中医证候诊断标准，拟定中医证候问卷量化表，将临床症状和症候逐项按无、轻微、明显和严重分别计为0,2,4和6分为量表制定统一操作规程，对研究者进行研究方法培训。
2.2白介素-10检测
2.2.1试剂与仪器：humanIL-10多克隆抗体、浓缩生物素化抗体、浓缩酶结合物；欣搏盛生物科技有限公司生物中心酶联免疫试剂盒；
2.2.2方法:确定微孔条需要测试所需的数量，包括标本、空白和标准品的微孔条数量并做复孔；添加相应浓度的100uL标准品；空白反应孔添加100uL标准品&标本稀释液；标本的反应孔添加100u1血标本；盖封板胶纸，振动筛振荡，360孵箱孵育90分钟；拆下封板胶纸。自动洗板机洗微孔条五次；加入100uL生物素化抗体工作液到标准和样本反应孔，加入生物素化抗体稀释液到空白的反应孔，盖封板胶纸。盖封板胶纸，振动筛振荡，360孵箱孵育60分钟。拆下封板胶纸。自动洗板机洗微孔条五次；加入100uL浓缩酶工作液到标准和样本反应孔，加入100uL浓缩酶稀释液到空白的反应孔；盖封板胶纸，振动筛振荡，360孵箱孵育15分钟；拆下封板胶纸。自动洗板机洗微孔条五次；加入100uL显色底物液到所有标准和样本反应孔；振动筛振荡，360孵箱孵育15分钟；迅速加入100uL终止液到所有孔阻止酶反应；使用酶标仪进行检测。
2.3统计方法:中医证型与血IL-10相关性分析，两组以上均数比较采用单因素方差分析，通过SPSS18.0统计软件处理，以P<0.05为有显著性差异的标准。
3结果
3.1所选五组患者血白介素-10浓度的均值士标准差数值(如表1)可见发病初期患者血白介素-10浓度持续升高，正常组与DM无蛋白尿组比较有统计学意义(p<0.05)，与其它组(少量蛋白尿组、大量蛋白尿组、肾功能不全组)比较差异无统计学意义(p>0.05)；
4讨沦
本研究结果显示，IL-10在健康对照组、糖尿病肾病无蛋白尿组(早期组)比较有统计学意义(p<0.05)，其中糖尿病肾病早期组比健康对照组数值高，说明糖尿病肾病早期的发生与炎性反应相关，此阶段未发生血管并发症时，IL-10伴随炎性反应而升高，而在以后糖尿病肾病组中，数值虽然较正常健康对照组是升高的，随着病情进展IL-10表达逐步降低，DN大量蛋白尿(糖尿病肾病Ⅲ期)及DN肾功能衰竭(糖尿病肾病Ⅳ期)和健康对照组水平接近，糖尿病肾病早期，IL-10在炎性因素的刺激下水平升高，而随着糖尿病肾病的发展，及其它并发症的出现，IL-10水平下降，说明IL-10在糖尿病肾病发展过程中的保护性作用，IL-10水平越高，糖尿病发生糖尿病肾病的可能性越低。从以上情况我们可以推测，IL-10表达水平可以作为中医辨证的微观和客观指标应用临床实践中，辅助甚至可以指导临床的辨证治疗用药，当然这仍需要通过进一步大样本及多中心临床实验来证明。
参考文献：
[1]刘志红，黎磊石.糖尿病肾病发病机理[J].中华肾脏病杂志，1999．15(2):120-123.