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N-乙酰半胱氨酸对脂多糖刺激仔猪免疫应激及能量状况的影响

2020-12-14阅读(575)

N-乙酰半胱氨酸对脂多糖刺激仔猪免疫应激及能量状况的影响

论文摘要

本文研究了N-乙酰半胱氨酸（NAC）对脂多糖（LPS）多次刺激仔猪免疫应激及能量状况的影响。试验采用单因子试验设计,选取18头健康仔猪（杜洛克×长白×大白,体重11.58±0.26 kg）,随机分成3个处理（对照组、LPS组和NAC组）,每个处理6个重复,每个重复1头猪。对照组和LPS组饲喂基础日粮,NAC组饲喂基础日粮+500 mg/kg NAC,LPS组和NAC组仔猪分别于试验的第10、13、20 d腹膜注射100μg/kg·BW的LPS,对照组注射等量的灭菌生理盐水。第10、20 d注射LPS或生理盐水3 h后前腔静脉采血,分离血浆,置于-80℃冰箱中,保存待测。试验第21 d仔猪麻醉后屠宰,取腓肠肌、小肠黏膜和肝脏样品,液氮研磨后,-80℃保存,待测。结果显示:1.NAC对LPS刺激仔猪肌肉能量状况的影响（1）NAC缓解了LPS刺激导致的腓肠肌三磷酸腺苷（ATP）、腺苷酸池（TAN）和能荷（EC）水平的降低（P<0.05）及一磷酸腺苷（AMP）水平和AMP/ATP比值的升高（P<0.05）;（2）NAC缓解了LPS刺激引起的腓肠肌磷酸化的AMP激活的蛋白激酶/AMP激活的蛋白激酶（PAMPK/AMPK）比值的升高（P<0.05）;（3）NAC缓解了LPS刺激引起的腓肠肌热休克蛋白70（HSP70）表达量的升高（P<0.05）。2.NAC对LPS刺激仔猪小肠黏膜免疫应激和能量状况的影响（1）NAC缓解了LPS刺激导致的血浆、空肠和回肠黏膜中TNF-α、IL-6、PGE2及十二指肠黏膜TNF-α含量的升高（P<0.05）,有缓解十二指肠黏膜IL-6含量升高的趋势（P<0.1）。（2）NAC缓解了LPS刺激导致的空肠和回肠黏膜核因子-κB（NF-κB）蛋白水平的升高（P<0.05）。（3）NAC缓解了LPS刺激引起的小肠各段黏膜HSP70蛋白水平的升高（P<0.05）。（4）NAC缓解了LPS刺激导致的十二指肠、空肠和回肠的ATP、EC水平的降低（P<0.05）及AMP水平和AMP/ATP比值的升高（P<0.05）。3.NAC对LPS刺激仔猪肝脏免疫应激和能量状况的影响（1）NAC缓解了LPS刺激导致的肝脏中TNF-α、IL-6和PGE2的升高（P<0.05）。（2）NAC缓解了LPS刺激导致的肝脏NF-κB和HSP70蛋白表达量的升高（P<0.05）。（3）NAC缓解了LPS刺激导致的肝脏中ATP、ADP和EC水平的降低（P<0.05）及AMP水平和AMP/ATP比值的升高（P<0.05）。由此可见,在本试验条件下:1.饲粮中添加500 mg/kg NAC可缓解LPS刺激引起的腓肠肌能量过度损耗,饲粮中添加500 mg/kg NAC可能通过抑制AMPK磷酸化,对腓肠肌的能量状况产生影响。2.LPS刺激引起仔猪小肠黏膜免疫应激,日粮中添加500 mg/kg NAC可能通过影响NF-κB信号通路,缓解LPS导致的血浆及小肠黏膜中炎性因子的升高,缓解免疫应激。NAC可缓解LPS刺激导致的小肠黏膜能量过度损耗,保护小肠黏膜,这可能是通过AMPK途径实现的。3.日粮中添加500 mg/kg NAC可通过影响NF-κB和HSP70的表达,抑制LPS刺激导致的肝脏中炎性因子的升高,缓解免疫应激;日粮中添加500 mg/kg NAC可提高仔猪肝脏腺苷酸水平,增加肝脏能量储备,缓解LPS刺激引起的肝脏能量过度损耗。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 第一章 绪论
  • 1.1 研究目的和意义
  • 1.2 NAC 的研究进展
  • 1.2.1 提高机体内 GSH 含量
  • 1.2.2 抑制炎症反应
  • 1.2.3 免疫调节作用
  • 1.2.4 清除自由基
  • 1.3 AMPK 与能量代谢
  • 1.3.1 AMPK 的结构
  • 1.3.2 AMPK 激活
  • 1.4 热休克蛋白70（HSP70）
  • 1.4.1 HSP70 的结构组成
  • 1.4.2 HSP70 的分类
  • 1.5 小结与展望
  • 1.6 研究内容
  • 第二章 试验研究
  • 试验一 NAC 对 LPS 刺激仔猪肌肉能量状况的影响
  • 1.1 材料与方法
  • 1.1.1 试验材料
  • 1.1.2 试验动物与试验方法
  • 1.1.3 试验日粮与饲养管理
  • 1.1.4 样品采集
  • 1.1.5 检测指标及方法
  • 1.1.6 统计分析
  • 1.2 结果与分析
  • 1.2.1 NAC 对 LPS 刺激仔猪腓肠肌腺苷酸水平的影响
  • 1.2.2 NAC 对 LPS 刺激仔猪腓肠肌 AMPK 和 PAMPK 表达量的影响..
  • 1.2.3 NAC 对 LPS 刺激仔猪腓肠肌 HSP70 表达量的影响
  • 1.3 讨论
  • 1.3.1 NAC 对 LPS 刺激仔猪腓肠肌腺苷酸水平的影响
  • 1.3.2 NAC 对 LPS 刺激仔猪腓肠肌 AMPK 和 PAMPK 表达量的影响..
  • 1.3.3 NAC 对 LPS 刺激仔猪腓肠肌 HSP70 表达量的影响
  • 1.4 小结
  • 试验二 NAC 对 LPS 刺激仔猪小肠黏膜免疫应激和能量状况的影响
  • 2.1 材料与方法
  • 2.1.1 试验材料
  • 2.1.2 试验动物与试验方法
  • 2.1.3 试验日粮与饲养管理
  • 2.1.4 样品采集
  • 2.1.5 检测指标及方法
  • 2.1.6 统计分析
  • 2.2 结果与分析
  • 2.2.1 NAC 对 LPS 刺激仔猪血浆和小肠黏膜炎性介质指标的影响.
  • 2.2.2 NAC 对 LPS 刺激仔猪小肠黏膜 NF-κB 表达量的影响
  • 2.2.3 NAC 对 LPS 刺激仔猪小肠黏膜 HSP70 表达量的影响
  • 2.2.4 NAC 对 LPS 刺激仔猪小肠黏膜腺苷酸水平的影响
  • 2.2.5 NAC 对 LPS 刺激仔猪小肠黏膜 AMPK 和 PAMPK 表达量的影响
  • 2.3 讨论
  • 2.3.1 NAC 对 LPS 刺激仔猪血浆和小肠黏膜中炎性介质指标的影响
  • 2.3.2 NAC 对 LPS 刺激仔猪小肠黏膜 NF-κB 表达量的影响
  • 2.3.3 NAC 对 LPS 刺激仔猪小肠黏膜 HSP70 表达量的影响
  • 2.3.4 NAC 对 LPS 刺激仔猪小肠黏膜腺苷酸水平的影响
  • 2.3.5 NAC 对 LPS 刺激仔猪小肠黏膜 AMPK 和 PAMPK 表达量的影响
  • 2.4 小结
  • 试验三 NAC 对 LPS 刺激仔猪肝脏免疫应激和能量状况的影响
  • 3.1 材料与方法
  • 3.1.1 试验材料
  • 3.1.2 试验动物与试验方法
  • 3.1.3 试验日粮与饲养管理
  • 3.1.4 样品采集
  • 3.1.5 检测指标及方法
  • 3.1.6 统计分析
  • 3.2 结果与分析
  • 3.2.1 NAC 对 LPS 刺激仔猪肝脏炎性介质指标的影响
  • 3.2.2 NAC 对 LPS 刺激仔猪肝脏 NF-κB 表达量的影响
  • 3.2.3 NAC 对 LPS 仔猪肝脏 HSP70 表达量的影响
  • 3.2.4 NAC 对 LPS 刺激仔猪肝脏腺苷酸水平影响
  • 3.2.5 NAC 对 LPS 仔猪肝脏 AMPK 和 PAMPK 表达量的影响
  • 3.3 讨论
  • 3.3.1 NAC 对 LPS 刺激仔猪肝脏炎性介质指标的影响
  • 3.3.2 NAC 对 LPS 刺激仔猪肝脏 NF-κB 表达量的影响
  • 3.3.3 NAC 对 LPS 刺激仔猪肝脏 HSP70 表达量的影响
  • 3.3.4 NAC 对 LPS 刺激对仔猪肝脏腺苷酸水平的影响
  • 3.3.5 NAC 对 LPS 刺激仔猪肝脏 AMPK 和 PAMPK 表达的影响
  • 3.4 小结
  • 第三章 结论与建议
  • 1 主要结论
  • 2 创新点
  • 3 有待进一步研究的问题
  • 参考文献
  • 致谢
  • 攻读学位期间的研究成果

    • 相关论文文献

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