论文摘要
高等植物花器官发育的研究是现代分子生物学研究的焦点之一,已在模式植物拟南芥、金鱼草等植物上取得了显著的进展,而在木本植物上的研究相对比较欠缺。本研究以锦橙、夏橙、梦脐和朋娜为试验材料,通过形态学观察和分子水平上的相关研究,旨在初步探索脐橙次生果形成的机制。主要结果如下:1在花芽形态分化时期,从脐橙和甜橙(Citrus sinensis Osbeck)花蕾石蜡切片以及扫描电镜观察比较可以看出:脐橙的花分生组织在雌蕊原基出现之后没有立即终止,产生了额外的干细胞,导致次生心皮原基的出现,从而产生了脐。由此我们推断脐橙次生果产生的关键时期是花芽形态分化雌蕊原基形成时。2以前人在模式植物上的研究结果为依据,选取可能的关键基因通过半定量RT-PCR和Real-Time PCR检测的方法筛选候选基因。结果表明,在次生果形成的关键时期,脐橙中WUS2、LFY、API、KNU基因的表达量明显高于甜橙,其他基因无显著差异。推测这些基因可能与次生果的形成有关。特别是WUS基因,结合前人研究进展和本研究中WUS2基因的表达特点-在第二期时脐橙中的表达量突然上升,我们推测其与脐橙次生果的形成有密切联系。WUS/AG途径很有可能参与了次生果的形成。3克隆得到WUS/AG途径上两个关键基因——4G、WUS的cDNA和DNA全长。序列比对后发现,这两个基因在甜橙和脐橙上的序列差异不大,基本可以排除由它们的序列变异导致次生果突变的可能性。