修占伍:检测犬细小病毒和犬瘟热病毒联合PCR/RT-PCR方法的建立及初步应用论文

修占伍:检测犬细小病毒和犬瘟热病毒联合PCR/RT-PCR方法的建立及初步应用论文

本文主要研究内容

作者修占伍,刘晋宇,李远超,孟媛,鲁承,高旭(2019)在《检测犬细小病毒和犬瘟热病毒联合PCR/RT-PCR方法的建立及初步应用》一文中研究指出:为了建立一种能同时检测犬细小病毒(CPV)和犬瘟热病毒(CDV)的快速鉴别PCR方法,试验根据GenBank中登录的CPV NS1基因和CDV F基因序列设计2对特异性引物,通过综合CPV单项PCR方法与CDV单项RT-PCR方法的扩增程序,最后确定出联合PCR/RT-PCR方法的最佳退火温度、延伸时间和循环次数等反应程序,并对扩增产物进行克隆鉴定,同时进行特异性试验、敏感性试验和临床病料的检测。结果表明:建立的联合PCR/RT-PCR方法可以在一个扩增体系内同时检测两种病毒,其最佳联合PCR/RT-PCR扩增退火温度为50.8℃;经特异性分析,联合PCR/RT-PCR方法对犬副流感病毒(CPIV)、狂犬病毒(RV)、犬腺病毒(CAV)的检测为阴性;经敏感性分析,联合PCR/RT-PCR方法在模板浓度稀释到1×100TCID50时仍能见到较清晰的特异性条带;应用联合PCR/RT-PCR方法对延吉市36份犬病料样本进行检测,CPV阳性率为25.00%,CDV阳性率为33.33%,CPV和CDV混合感染阳性率为8.33%。说明试验建立的CPV和CDV联合PCR/RT-PCR检测方法特异性强、敏感性高,可用于犬细小病毒病和犬瘟热病毒病的临床诊断。

Abstract

wei le jian li yi chong neng tong shi jian ce quan xi xiao bing du (CPV)he quan wen re bing du (CDV)de kuai su jian bie PCRfang fa ,shi yan gen ju GenBankzhong deng lu de CPV NS1ji yin he CDV Fji yin xu lie she ji 2dui te yi xing yin wu ,tong guo zeng ge CPVchan xiang PCRfang fa yu CDVchan xiang RT-PCRfang fa de kuo zeng cheng xu ,zui hou que ding chu lian ge PCR/RT-PCRfang fa de zui jia tui huo wen du 、yan shen shi jian he xun huan ci shu deng fan ying cheng xu ,bing dui kuo zeng chan wu jin hang ke long jian ding ,tong shi jin hang te yi xing shi yan 、min gan xing shi yan he lin chuang bing liao de jian ce 。jie guo biao ming :jian li de lian ge PCR/RT-PCRfang fa ke yi zai yi ge kuo zeng ti ji nei tong shi jian ce liang chong bing du ,ji zui jia lian ge PCR/RT-PCRkuo zeng tui huo wen du wei 50.8℃;jing te yi xing fen xi ,lian ge PCR/RT-PCRfang fa dui quan fu liu gan bing du (CPIV)、kuang quan bing du (RV)、quan xian bing du (CAV)de jian ce wei yin xing ;jing min gan xing fen xi ,lian ge PCR/RT-PCRfang fa zai mo ban nong du xi shi dao 1×100TCID50shi reng neng jian dao jiao qing xi de te yi xing tiao dai ;ying yong lian ge PCR/RT-PCRfang fa dui yan ji shi 36fen quan bing liao yang ben jin hang jian ce ,CPVyang xing lv wei 25.00%,CDVyang xing lv wei 33.33%,CPVhe CDVhun ge gan ran yang xing lv wei 8.33%。shui ming shi yan jian li de CPVhe CDVlian ge PCR/RT-PCRjian ce fang fa te yi xing jiang 、min gan xing gao ,ke yong yu quan xi xiao bing du bing he quan wen re bing du bing de lin chuang zhen duan 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自黑龙江畜牧兽医的修占伍,刘晋宇,李远超,孟媛,鲁承,高旭,发表于刊物黑龙江畜牧兽医2019年03期论文,是一篇关于犬细小病毒论文,犬瘟热病毒论文,联合论文,检测论文,建立论文,初步应用论文,黑龙江畜牧兽医2019年03期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自黑龙江畜牧兽医2019年03期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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