我国部分地区猪戊型肝炎病毒感染情况的调查

论文摘要

戊型肝炎病毒（HEV）是一种无包膜、正链RNA病毒。它通过粪-口途径传播,诱发戊型肝炎。戊型肝炎即有大规模的暴发流行,也存在急性散发,多发于发展中国家和卫生条件差的地区。猪作为HEV的易感宿主,在HEV传播过程中发挥着重要作用,因此,了解我国猪的HEV感染情况,对于指导家畜养殖和防止HEV的传播与扩散有着重要意义。本课题从我国湖南、湖北和河南地区采集猪血清3346份,根据猪场、月龄及省份等进行分组。使用HEV抗体酶联免疫诊断试剂盒（双抗原夹心法）、HEV抗原诊断试剂盒（酶联免疫法）分别检测样本的HEV抗体与抗原,并计算阳性率。结果显示,抗-HEV抗体阳性率为81.92%,抗原阳性率为9.21%,各地区抗体和抗原的最高阳性率分别为100%和37.50%,3个省份间猪的HEV抗原和抗-HEV抗体阳性率差异显著（P<0.01）。且3月龄以下猪的抗体阳性率和高滴度抗体的比例低,而抗原阳性率明显升高。在血清学检测的基础上,应用HEV核酸荧光RT-PCR检测试剂盒对HEV抗原阳性及抗体S/CO值≤10的1314份样本进行核酸检测,共测出64份样本HEV核酸阳性,其中有50份样本为HEV抗原阳性。对HEV核酸阳性样本用套式RT-PCR进行扩增并对阳性产物进行测序分析,共得到的32株HEV基因序列,其中3株为1型、29株为4型。在29株4型基因序列中有14株不同于任何已报道的亚型。以上研究提示,虽然各地区的感染率不同,但感染率普遍较高,而且感染的基因型主要为4型。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 材料与方法
• 一、实验材料
• 1. 血清样本
• 2. 菌株和质粒
• 3. 主要生化以及分子生物学试剂
• 4.H EV 抗原、抗体以及实时荧光核酸检测试剂
• 5. 主要仪器设备
• 6. 主要溶液以及培养基等
• 二、样本检测程序
• 三、实验方法
• 1.E LISA 检测
• 2. 实时荧光RT-PCR 检测
• 3. 套式RT-PCR 检测
• 4. 套式RT-PCR 产物的克隆和序列分析
• 5. 检测结果的统计分析
• 结果
• 一、抗体检测
• 1. 湖北地区样本的抗体检测
• 2. 湖南地区样本的抗体检测
• 3. 河南地区样本的抗体检测
• 4. 不同地区样本的抗体检测结果汇总
• 二、抗原检测
• 1. 湖北地区样本的抗原检测
• 2. 湖南地区样本的抗原检测
• 3. 河南地区样本的抗原检测
• 4. 不同地区样本的抗原检测结果汇总
• 三、HEV 抗原和抗体关系的分析
• 四、实时荧光RT-PCR 检测及HEV 核酸与抗原和抗体的关系
• 五、套式RT-PCR 检测及核酸序列分析
• 1. 套式RT-PCR 的检测及克隆
• 2. 核酸序列分析
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 1、英文缩略词表
• 2、溶液配方
• 综述
• 论文
• 致谢