HPLC法测定尿样中甲苯、苯乙烯、正己烷代谢产物的研究

论文摘要

甲苯、苯乙烯、正己烷等有机化合物是重要的化工原料,广泛应用于工业和科学研究领域。在工作场所,人体通过呼吸道吸入或经皮肤接触会造成神经、呼吸、生殖、消化、心血管、泌尿、皮肤、血液等系统和组织不同程度的损伤。因此,在工作环境中对上述在我国使用较多、且易引起中毒的物质进行监测和监管具有重要意义。吸入的有害物质经体内代谢后可在尿液、血液等生物材料中检出,该种生物材料中有害物质代谢产物的生物监测可为空气中有机毒物的监测提供有效补充,使监测结果更加科学、准确。然而,目前尚未建立用于正常人尿中多种有毒物质代谢物同时检测的成熟方法,缺少非接触人群尿中本底值数据库,以建立相关中毒标准及法律法规。为此,建立一种用于正常人尿样中有毒代谢物检测的方法,为非接触人群尿中本底值数据库的建立提供技术支持是十分必要的。本研究建立了高效液相色谱同时测定尿样中2,5-己二酮、苯乙醇酸、马尿酸、邻甲酚的方法。考察了色谱柱类型、柱温、流动相组成及配比、流速、检测波长等色谱条件对分离和检测的影响,确定了最佳色谱条件为：色谱柱为Diamonsil（钻石）C18柱,采用紫外检测器双通道双波长检测,即马尿酸、苯乙醇酸检测波长为254 nm,2,5-己二酮、邻甲酚检测波长为271 nm,以甲醇-混酸水溶液（0.012%醋酸+0.008%磷酸）为流动相,采用梯度洗脱方式,柱温30℃,流动相流速1.0 mL/min,进样量7μL。建立了四种化合物标准曲线,相关系数为0.9994-0.9997,各组分的检出限在0.002～0.1μg/mL。用正交实验法优化样品预处理条件,并对样品进行测定,各组分平均回收率为82-103%,相对标准偏差为3.2-4.8%。研究结果表明,所建立的高效液相色谱同时测定尿样中2,5-己二酮、苯乙醇酸、马尿酸、邻甲酚的方法、检出限较低、精密度良好,适用于非接触人群尿本底的检测。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 前言
• 1.1 工作场所有害物质监测概况
• 1.1.1 工作场所有害物质监测的意义
• 1.1.2 工作场所有害物质监测方法
• 1.2 生物监测概述
• 1.2.1 生物监测的方法
• 1.2.2 生物监测指标及生物接触限值
• 1.2.3 生物监测中的生物材料
• 1.3 工作场所中常见有害物质概述
• 1.3.1 甲苯
• 1.3.2 苯乙烯
• 1.3.3 正己烷
• 1.4 四种尿代谢产物的结构与性质
• 1.4.1 马尿酸
• 1.4.2 邻甲酚
• 1.4.3 苯乙醇酸
• 1.4.4 丙酮基丙酮（2,5-己二酮）
• 1.5 四种尿代谢产物的分析方法
• 1.5.1 分光光度法
• 1.5.2 气相色谱法及气相-质谱联用法
• 1.5.3 高效液相色谱法
• 1.5.4 毛细管电泳法
• 1.5.5 紫外吸收光谱法
• 1.5.6 薄层色谱法
• 1.5.7 电化学发光法
• 1.6 本论文的选题背景、目的及意义
• 第二章 方法和原理
• 2.1 引言
• 2.2 分离原理
• 2.3 定性及定量依据
• 第三章 实验部分
• 3.1 仪器与试剂
• 3.1.1 仪器
• 3.1.2 试剂
• 3.2 色谱条件
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 尿样来源与预处理方法
• 3.3.2 仪器操作
• 第四章 结果与讨论
• 4.1 色谱条件的确定
• 4.1.1 色谱分离模式及色谱柱的确定
• 4.1.2 紫外检测波长的选择
• 4.1.3 流动相体系的选择
• 4.1.4 分离对象的确定
• 4.1.5 流动相配比及梯度洗脱方式的确定
• 4.1.6 梯度洗脱程序的选择
• 4.1.7 混酸用量的选择
• 4.1.8 流动相流速的选择
• 4.1.9 色谱柱柱温的选择
• 4.1.10 进样量的选择
• 4.1.11 最佳色谱条件及其色谱图
• 4.2 样品预处理条件的确定
• 4.2.1 液液萃取溶剂的选择
• 4.2.2 正交实验
• 4.3 干扰实验
• 4.4 标准曲线的绘制
• 4.5 检出限及线性范围
• 4.6 样品测定
• 4.7 精密度实验
• 4.7.1 仪器精密度实验
• 4.7.2 方法精密度实验
• 4.8 回收率实验
• 4.9 稳定性实验
• 4.9.1 标准溶液稳定性实验
• 4.9.2 尿样中待测物质稳定性实验
• 第五章 结论
• 参考文献
• 致谢