论文摘要
骨髓间充质干细胞是骨髓内造血干细胞以外的非造血干细胞,具有多向分化潜能,骨髓间充质干细胞分化为肝细胞的研究进展,为肝细胞移植提供了新型的种子细胞,开辟了广阔的应用前景。目的:探讨骨髓MSCs 分离纯化的方法及损伤肝组织匀浆对其诱导分化作用,同时从细胞形态学对骨髓MSCs 的生长特性进行观察,并将此细胞植入肝损伤的大鼠肝脏内,从功能水平检测这些细胞对肝损伤大鼠的的临床治疗效果,研究骨髓MSCs 在肝脏损伤修复中的应用价值。方法:抽取大乳鼠四肢骨骨髓,淋巴细胞分离液密度梯度离心获得单个核细胞,贴壁培养和消化时间控制相结合得到高纯度的骨髓MSCs,在含10%FBS 的L-DMEN 培养液中扩增培养。传代后以10%FBS、10%损伤肝组织匀浆的L-DMEN 培养液对其进行诱导培养,观察在体外培养条件下骨髓MSCs 的形态,分化特性和诱导培养后的白蛋白表达情况。将传代培养和诱导培养的骨髓MSCs 植入肝损伤大鼠体内,在不同检测点检测大鼠血液生化指标,观察移植细胞对大鼠肝脏功能的影响。结果:1、分离获得了高纯度贴壁生长的MSCs。MSCs 原代培养呈均匀分布的集落样生长,呈梭形,传代培养中细胞均质性明显提高,细胞传代稳定,在体外连续传代培养9 代,未发生形态学改变,无衰老征象;2、传代培养MSCs（P3）在20%马血清的L-DMEM 培养液中分化为脂肪细胞,油红O 结合苏木素染色细胞核呈浅兰色,橘红色脂肪滴清晰可见;3、传代（P3）后以10%FBS、10%损伤肝组织匀浆的L-DMEN 培养液对其进行诱导培养,免疫细胞化学染色白蛋白阳性。4、肝内移植传代和诱导后的骨髓MSCs 后,模型鼠的一般情况和血清生化指标与对照组比较都发生了明
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