论文摘要
Ⅱ型肺上皮细胞能够合成和分泌肺表面活性物质（pulmonary surfactant,PS）,调控肺的功能并与肺损伤后的修复有关。很多肺相关疾病的发生伴随有Ⅱ型肺上皮细胞功能不全及PS系统缺陷。然而Ⅱ型肺上皮细胞在肺的发育、机体免疫及疾病的发生发展过程中的具体功能尚不明确,对调控Ⅱ型肺上皮细胞功能的遗传机制也知之甚少。 为了利用Cre-LoxP系统研究调节Ⅱ型肺上皮细胞功能的遗传机制,我们研制了表面活性蛋白（SP-A）启动子指导Cre重组酶基因在转基因小鼠Ⅱ型肺上皮细胞中表达的转基因小鼠。构建了含有表面活性蛋白A（SP-A）启动子、Cre重组酶基因和人生长激素基因polyA的转基因载体pSP-A-Cre。通过显微注射将线性化的转基因载体引入小鼠808枚受精卵中,其中729枚移植入36只假孕母鼠的输卵管中使其发育,共获得子代小鼠133只。经PCR和Southern检测鉴定出11只在基因组上整合有Cre重组酶基因的小鼠。将整合有Cre重组酶基因的首建者小鼠与Smad4条件基因打靶小鼠及ROSA26报告小鼠交配,利用基因组PCR和LacZ染色检测Cre重组酶表达的组织分布及其体内介导LoxP位点间重组的活性。结果显示我们获得了2个具有不同组织表达谱的Cre重组酶转基因小鼠。SP-A-Cre1转基因小鼠的肺、脑和消化道组织中表达Cre重组酶,Cre表达的组织分布与前人报道的SP-A组织分布一致。SP-A-Cre2转基因小鼠仅在肺组织中特异性表达Cre重组酶。将SP-A-Cre1转基因小鼠与Smad4条件打靶小鼠(Smad4co/co)交配获得了Smad4基因剔除小鼠。SP-A-Cre1;Smad4co/co小鼠出生后2天开始出现体形矮小,头颅发育异常,出生后5天死亡。 所有这些结果表明本研究研制的两株SP-A-Cre转基因小鼠均在Ⅱ型肺上皮细胞中表达有活性的Cre重组酶。这些SP-A-Cre转基因小鼠是在Ⅱ型肺上皮细胞进行条件基因剔除研究以及进行SP-A表达细胞谱系分析的有力工具。
论文目录
相关论文文献
- [1].碳阻遏因子CRE对匍枝根霉产纤维素酶调控作用的研究[J]. 中国生物工程杂志 2016(03)
- [2].造血系统常用Cre转基因小鼠及其应用[J]. 中国实验血液学杂志 2014(05)
- [3].增强子驱动的Cre转基因小鼠的构建及Cre基因的表达鉴定[J]. 生物技术通讯 2010(03)
- [4].水稻CRE基因的克隆、分析及其高效表达载体的构建[J]. 广东农业科学 2012(14)
- [5].CRE变频泵在火电厂输煤工业水系统中的应用[J]. 制冷空调与电力机械 2010(04)
- [6].肥大软骨细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立[J]. 遗传 2009(01)
- [7].基于CRE的供应链渠道协作利润优化研究[J]. 经济数学 2008(02)
- [8].博莱霉素诱导α平滑肌肌动蛋白Cre重组酶转基因小鼠肺纤维化上皮细胞-间质转分化的研究[J]. 中国呼吸与危重监护杂志 2009(01)
- [9].CRE对多粘菌素B的敏感性及两种检测方法的差异[J]. 中国感染控制杂志 2019(11)
- [10].MDT模式下神经外科CRE院内感染管理探讨[J]. 吉林医学 2020(07)
- [11].基于CRE与ABS的异构蜂窝干扰协调方案[J]. 数据采集与处理 2016(03)
- [12].CRE球囊扩张导管在食道狭窄病变的应用分析[J]. 牡丹江医学院学报 2010(02)
- [13].循证研究对预防多发性骨髓瘤患者CRE感染的应用效果[J]. 中华医院感染学杂志 2018(23)
- [14].重症监护病区CRE主动筛查及其效果评价[J]. 中华医院感染学杂志 2017(18)
- [15].双浓度联合改良碳青霉烯灭活试验筛查CRE的临床应用价值[J]. 检验医学 2020(10)
- [16].碳青霉烯类药物延长滴注治疗CRE肺部感染1例[J]. 武警医学 2019(12)
- [17].CRE方法在Boussinesq-Burgers方程中的应用[J]. 东北师大学报(自然科学版) 2019(04)
- [18].肝特异性表达Cre重组酶转基因猪成纤维细胞的建立[J]. 中国畜牧兽医 2012(10)
- [19].小儿肝移植术后CRE感染的病例分析[J]. 实用器官移植电子杂志 2020(01)
- [20].福建某基层医院CRE碳青霉烯类耐药基因分析[J]. 中国微生态学杂志 2017(03)
- [21].PIWIL1基因启动子调控的特异表达Cre重组酶的转基因猪的构建[J]. 安徽农业科学 2012(09)
- [22].造血干细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立[J]. 中国科学:生命科学 2011(10)
- [23].诱导性表达Cre重组酶转基因猪成纤维细胞的构建及鉴定[J]. 中国兽医学报 2009(09)
- [24].Cre重组酶的研究进展[J]. 东北农业大学学报 2009(12)
- [25].诱导性表达Cre重组酶转基因载体的构建及鉴定[J]. 中国组织工程研究与临床康复 2008(46)
- [26].PTH、BUN及CRe联合检测对早期肾功能衰竭的诊断价值[J]. 现代生物医学进展 2014(35)
- [27].顶端外胚层嵴表达Cre重组酶转基因小鼠的鉴定[J]. 科技致富向导 2011(11)
- [28].Kap147/Kpn杂合启动子引导Cre重组酶在转基因小鼠睾丸组织中特异性表达[J]. 华东理工大学学报(自然科学版) 2019(06)
- [29].利用细菌内同源重组技术构建胰岛β细胞特异性表达Cre重组酶的基因敲入打靶载体[J]. 第二军医大学学报 2014(02)
- [30].老年恶性肿瘤患者CRE医院感染分布特点及耐药性分析[J]. 临床医药文献电子杂志 2019(65)