论文摘要
湖南湘西地区为山区环境，与其它地形区域相比较，相对较为封闭．在这样的地域，疫病的流行有其自身的特点。同时，该地区也是湖南省人狂犬病的多发地区。为了解该地区的外观健康犬携带狂犬病病毒的情况和分析当地的狂犬病病毒的遗传特征，我们于2005年9月从湘西狂犬病疫点采集了38份扑杀的外观健康的犬脑组织，并于2006年1月在湘西农贸市场采集了168份外观健康的犬脑组织。RT-PCR和直接荧光抗体试验（FAT）检测表明共有5份犬脑标本为阳性，并用乳鼠脑内接种的方法分离得到了5株狂犬病病毒毒株，分子流行病学分析表明这5株病毒均为野毒。在这5份阳性标本，疫点有4份，检出率为10.5％，市场1份，检出率为0.59％。我们的调查结果表明疫点的外观健康犬携带狂犬病病毒的检出率与国内的其它报道接近，而从市场采集的标本的检出率却要低很多。非疫点的外观正常犬带毒率低是否与湘西地区相对封闭的环境有关、还是因为样本采集于冬季之故还有待进一步研究证实。此外应大量的采集不同季节犬的标本进行检测，为人间狂犬病的防制提供更为准确的动物流行病学资料。同时还对湘西分离病毒的N基因和G基因进行扩增、克隆测序后进行遗传进化分析，5株病毒间的N基因核苷酸同源性在97.1～98.7％之间，氨基酸同源性在98.4～99.3％之间；G基因的核苷酸同源性在96.0～98.7％之间，氨基酸同源性在98.1～99.0％之间。结果表明所分离的5株病毒均为基因Ⅰ型狂犬病病毒，且5株分离毒有很近的亲缘关系。湘西分离的狂犬病病毒与以往国内的湖南分离株、湖北分离株、江西分离株、江苏分离株、广西分离株、河南分离株、安徽分离株、贵州分离株、宁夏分离株重庆分离株的同源性很高，N基因的核苷酸同源性在88.5～98.4％之间，氨基酸同源性在97.3～99.3％之间；G基因的核苷酸同源性在86.7～98.7％之间，氨基酸同源性在94.7～99.0％之间。结果表明湘西分离株与以往国内的分离株的亲缘关系较近。与国外的印度尼西亚分离株、泰国分离株、马来西亚分离株同源性也较高，N基因核苷酸同源性在88.0～92.2％之间，氨基酸同源性在96.9～97.9％之间；G基因的核苷酸同源性在85.4～92.4％之间，氨基酸同源性在93.7～96.8％之间。但与美国、加拿大、澳大利亚、印度、韩国、法国、德国、匈牙利、俄罗斯、波兰、埃塞俄比亚的毒株的同源性较低。N基因核苷酸同源性在75.5～88.5％之间，氨基酸同源性在91.6～98.7％之间；G基因的核苷酸同源性在80.6～84.8％之间，氨基酸同源性在90.5～93.9％之间。由此也说明湘西分离株与东南亚的部分毒株有较近的亲缘关系，而与美洲、澳洲、欧洲、非洲和亚洲的部分毒株亲缘关系较远。湘西分离毒与疫苗株CTN、3aG、PV、ERA进行N基因和G基因的核苷酸和推定氨基酸的比较，N基因核苷酸同源性在86.2～89.9％之间，氨基酸同源性在94.5～98.4％之间；G基因的核苷酸同源性在80.5～86.1％之间，氨基酸同源性在87.9～92.9％之间。而国内其它的分离株与疫苗株CTN、3aG、PV、ERA的N基因和G基因的同源性与上述数据接近，我们可以推测国内常用的疫苗株CTN、3aG对湘西分离株仍具有较好的保护效力，可用来指导湘西的狂犬病预防和控制工作。