超声破坏载紫杉醇微泡对宫颈癌HeLa细胞株作用的研究

论文摘要

第一部分紫杉醇对宫颈癌HeLa细胞抑制浓度及超声破坏微泡的辐照参数选择目的:探索紫杉醇对宫颈癌HeLa细胞株的适宜抑制浓度及超声破坏微泡的适宜辐照参数。方法:体外培养宫颈癌细胞,采用MTT比色法检测不同剂量紫杉醇对宫颈癌HeLa细胞的增殖抑制作用和不同辐照时间超声破坏空白微泡对HeLa细胞的急性毒作用,并以此确定适宜的紫杉醇剂量以及超声辐照参数。结果:1.当紫杉醇浓度为10-9、10-8、10-7、10-6、10-5、10-4mol/L时,细胞在72h的增殖抑制率分别为（32.37±1.12）%、（42.97±2.18）%、（51.45±0.86）%、（62.48±0.95）%、（69.81±0.57）%、（76.06±2.4）%。当紫杉醇浓度为10-9mol/L时,24h、48h、72h的增殖抑制率分别为（11.52±1.08）%、（24.6±0.35）%、（32.37±1.12）%。其增殖抑制作用有明显的时间效应和剂量效应关系。当声强为0.5W/cm2,辐照时间20S即可破坏微泡。2.声强固定在0.5W/cm2,时间10S、20S、30S,破坏微泡后即检测细胞的存活率为（92.84±0.66）%、（85.69±2.67）%、（76.61±2.74）%。结论:紫杉醇对宫颈癌HeLa细胞有增殖抑制作用。适宜参数下超声破坏空白微泡对宫颈癌HeLa细胞的急性毒作用影响不大。适宜的超声辐照参数为0.5W/cm2、20S,紫杉醇剂量为10-7mol/L。第二部分超声破坏载紫杉醇微泡对宫颈癌HeLa细胞株增殖、凋亡的影响研究目的:观察超声破坏载紫杉醇微泡对宫颈癌HeLa细胞株的增殖、凋亡以及细胞周期改变的影响。方法: 1.体外培养宫颈癌细胞,将细胞分为5组,即紫杉醇组、紫杉醇联合超声辐照组、载紫杉醇微泡联合超声辐照组、载紫杉醇微泡组及空白对照组,MTT比色法检测不同观察时间点各组细胞的增殖抑制情况2.透射电镜观察各组细胞的超微结构变化。3.FCM分析各组细胞凋亡诱导及细胞周期的改变。结果:1.超声破坏载紫杉醇微泡组、紫杉醇组及超声联合紫杉醇组均能明显抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖,超声破坏紫杉醇微泡组的作用更为明显,三组之间比较,差异具有显著意义（P<0.01）,而相同浓度的载紫杉醇微泡组对HeLa细胞的增殖影响不显著。2.透射电镜观察到超声联合紫杉醇微泡组可见凋亡小体,超声联合紫杉醇可见凋亡细胞,紫杉醇组观察到早期凋亡细胞,空白组和单纯微泡组细胞形态较为正常。3.FCM定量分析结果表明各组细胞的凋亡率分别为:空白组（2.18±0.11）%、单纯紫杉醇微泡组（5.21±0.34）%、单纯紫杉醇组（11.77±0.54）%、紫杉醇联合超声组（15.69±0.43）%、紫杉醇微泡联合超声组（27.5±0.59）%。超声破坏载紫杉醇微泡组、紫杉醇组及紫杉醇联合超声组均表现为G2/M阻滞,进入S期和G0/G1期细胞减少。各组细胞的阻滞率分别为:空白组（9.7±1.81）%、单纯紫杉醇微泡组（14.05±0.8）%、单纯紫杉醇组（22.04±1.51）%、紫杉醇联合超声组（33.28±2.92）%、紫杉醇微泡联合超声组（68.28±2.62）%。结论:超声破坏紫杉醇微泡不仅能显著抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,还有显著诱导其凋亡的作用,细胞被阻滞于G2/M期。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一部分 紫杉醇对宫颈癌HELA 细胞抑制浓度及超声破坏微泡的辐照参数选择
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 第二部分 超声破坏载紫杉醇微泡对宫颈癌HELA 细胞株增殖、凋亡的影响研究
• 1 材料与方法
• 2 结果
• 3 讨论
• 全文总结
• 参考文献
• 附图
• 文献综述
• 致谢
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