广西杀虫性大型有毒真菌筛选及菌丝体人工培养的初步研究

广西杀虫性大型有毒真菌筛选及菌丝体人工培养的初步研究

论文摘要

本文总结了广西杀虫性大型有毒真菌筛选及菌丝体人工培养的初步研究结果。从广西不同地区采集到28种大型有毒真菌,这些大型有毒真菌分属13科,其中鹅膏菌科(Amanitaceae)5种,白蘑科(Tricholomataceae)4种,蘑菇科(Agaricacea)、鬼伞科(Coprinaceae)、牛肝菌科(Boletaceae)各3种。将这28种大型有毒真菌的新鲜子实体和培养物,分别选用水、乙醇、石油醚作为溶剂进行提取、获得粗提取物,然后以斜纹夜蛾(Prodeniaa litura)和小菜蛾(Pultella xylostella)作为供试害虫,进行杀虫活性的测定试验,结果发现:有24种大型有毒真菌新鲜子实体粗提取物对斜纹夜蛾幼虫具有杀虫活性,有23种对小菜蛾幼虫具有杀虫活性。其中角鳞白鹅膏菌(Amanita solitaria)、角鳞灰鹅膏菌(A.spissacea)、残斑托鹅膏菌(A.sychnopyramis)的蒸馏水粗提取物对斜纹夜蛾和小菜蛾幼虫的杀虫作用非常明显,其3 d校正死亡率均为100%。除硬黄皮马勃(Sclerderma flavidum)、橘黄裸伞(Gymnopilus spectabilis)、残斑托鹅膏菌外其余大型有毒真菌的杀虫活性在国内均为首次报道。墨汁鬼伞(Coprinus atramentarius)和绿褐裸伞(Gymnopilus aeraginosus)的固体培养菌丝体的粗提取物对斜纹夜蛾具有杀虫活性,灰鹅膏菌(A.vaginata),暗褐毒鹅膏菌(A.brunnescens)等4种大型有毒真菌液体培养产物对斜纹夜蛾和小菜蛾幼虫有杀虫活性。对这28种大型有毒真菌进行分离、人工培养的试验结果表明,暗褐毒鹅膏菌、灰鹅膏菌、粪生光盖伞(Psilocybe coprophila)等10种大型有毒真菌能够分离、培养得到菌丝体。其中暗褐毒鹅膏菌、灰鹅膏菌和绿褐裸伞菌丝体的分离和培养在国内尚属首次。结合杀虫活性试验结果,选择既具有一定杀虫活性又能人工分离培养的墨汁鬼伞、绿褐裸伞、暗褐毒鹅膏菌和灰鹅膏菌这4种大型有毒真菌进行人工培养特性的试验研究,结果如下,墨汁鬼伞菌丝体的适宜固体培养基为PDA+牛粪浸液培养基,以乳糖和蛋白胨为适宜的碳氮源,适宜培养温度为28~32℃,适宜pH为7.0;绿褐裸伞菌丝体的适宜固体培养基为PDA+树叶浸出液培养基,碳源为葡萄糖、氮源为干酪素;适宜培养温度为30℃,适宜pH为6.0左右;暗褐毒鹅膏菌、灰鹅膏菌的菌丝体适宜固体培养基均为PDM培养基,适宜碳源分别麦芽糖和甘露醇;适宜氮源分别为酵母粉和干酪素;适宜培养温度分别为30℃、28℃,适宜pH分别为5.0和6.0。为了给规模化人工培养提供依据,对较有研究和开发价值的墨汁鬼伞进行了菌丝体液体培养试验研究,结果显示,墨汁鬼伞菌丝体的适宜液体培养基组成为葡萄糖2.0%,脱脂豆粉0.5%,K2HPO40.3%,MgSO4·5H2O 0.3%,10%牛粪浸液;适宜培养温度为28℃,适宜pH为7.0,适宜装液量为90 ml(250 ml锥形瓶),接种量以体积分数10%为好。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 1 前言
  • 1.1 概述
  • 1.2 大型有毒真菌的杀虫活性研究
  • 1.2.1 鹅膏菌科(Amanitaceae)大型有毒真菌的杀虫活性
  • 1.2.2 白蘑科(Tricholomataceae)大型有毒真菌的杀虫活性
  • 1.2.3 牛肝菌科(Boletaceae)大型有毒真菌的杀虫活性
  • 1.2.4 其他大型有毒真菌的杀虫活性
  • 1.3 大型有毒真菌的人工培养研究
  • 1.4 大型有毒真菌杀虫活性研究中存在的主要问题
  • 1.5 本研究的目的意义
  • 2 材料与方法
  • 2.1 材料
  • 2.1.1 大型有毒真菌
  • 2.1.2 供试昆虫
  • 2.1.3 仪器与试剂
  • 2.1.4 培养基
  • 2.2 方法
  • 2.2.1 广西杀虫性大型有毒真菌的采集和鉴定
  • 2.2.2 大型有毒真菌菌丝体的分离与纯化
  • 2.2.3 大型有毒真菌杀虫活性的测定
  • 2.2.3.1 野生子实体杀虫活性的测定
  • 2.2.3.2 室内培养产物杀虫活性的测定
  • 2.2.4 四种大型有毒真菌菌丝体的人工培养特性研究
  • 2.2.5 墨汁鬼伞菌丝体液体培养的初步研究
  • 3 结果与分析
  • 3.1 广西大型有毒真菌的采集与菌种的分离
  • 3.1.1 大型有毒真菌的采集与鉴定
  • 3.1.2 大型有毒真菌菌丝体的分离与纯化
  • 3.2 四种大型有毒真菌的形态特征
  • 3.2.1 野生子实体的形态特征
  • 3.2.2 人工培养菌丝体的菌落形态特征
  • 3.3 杀虫性大型有毒真菌的初步筛选
  • 3.3.1 野生子实体的杀虫活性
  • 3.3.2 室内培养产物的杀虫活性
  • 3.4 四种大型有毒真菌菌丝体的人工培养特性
  • 3.4.1 不同固体培养基对菌丝体生长的影响
  • 3.4.2 不同碳源对菌丝体生长的影响
  • 3.4.3 不同氮源对菌丝体生长的影响
  • 3.4.4 不同温度对菌丝体生长的影响
  • 3.4.5 不同pH值对菌丝体生长的影响
  • 3.5 墨汁鬼伞菌丝体液体培养的初步研究
  • 3.5.1 液体培养基的筛选
  • 3.5.2 墨汁鬼伞液体培养条件的选择
  • 4 小结与讨论
  • 4.1 小结
  • 4.2 讨论
  • 4.3 问题与展望
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附录
  • 相关论文文献

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