香鳞毛蕨中生物活性物质的筛选

论文摘要

香鳞毛蕨Dryopteris fragrans（L.）Schott为鳞毛蕨科鳞毛蕨属植物,落叶多年生草本,生于高寒地区的滑石坡、森林中的碎石坡上和火山周围的岩浆缝隙中。该植物在黑龙江、辽宁、吉林、内蒙古和河北地区均有分布,在我省主要分布于五大连池、塔河县白卡兽山、呼中大白山的高山地带及小兴安岭北部地区。香鳞毛蕨药用历史悠久,生理活性较强,民间应用广泛。为了从香鳞毛蕨中寻找新的药用活性先导化合物,本文对其进行了系统研究。将香鳞毛蕨乙醇提取物经过AB-8大孔吸附树脂吸附,得到水洗脱组分、30%乙醇洗脱组分、70%乙醇洗脱组分和90%乙醇洗脱组分。通过对2种肿瘤细胞的抗肿瘤活性筛选,对T淋巴细胞进行的免疫调节活性筛选,确定30%乙醇洗脱组分为具有抗肿瘤及免疫调节作用的有效部位。在前期有效部位确定的基础上,通过硅胶、ODS柱色谱和HPLC等现代提取分离方法和手段,对30%乙醇洗脱组分进行分离,在分离过程中始终贯穿活性跟踪,分别对Bel-7402、A549肿瘤细胞株进行了抗肿瘤活性筛选,对T淋巴细胞进行了免疫调节活性筛选。其中得到具有抗肿瘤作用的活性组分2个,具有免疫调节作用的活性组分2个,对活性组分进一步分离得到10个化合物,通过1H-NMR、13C-NMR、HMBC和DEPT等现代波谱学测试技术,并结合ESI-MS质谱,以及与文献数据对比对其进行了结构鉴定。当化合物的浓度在5μg/mL时,化合物3对2种肿瘤细胞株均具有极强抑制作用,化合物10、5协同ConA对T淋巴细胞具有显著的促进作用,说明具有非常好的免疫调节活性。本论文对香鳞毛蕨进行了化学成分的活性跟踪分离,最终得到了3个有活性的先导化合物,并且此3个化合物的生物活性为首次确定,为进一步研发新药奠定了基础。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 第1章 引言
• 1.1 抗肿瘤药物的研究现状
• 1.1.1 以细胞信号转导分子为靶点的抗肿瘤药物
• 1.1.2 新生血管生成抑制剂
• 1.1.3 端粒酶抑制剂
• 1.1.4 反义药物
• 1.1.5 肿瘤耐药逆转剂
• 1.1.6 分化诱导剂
• 1.1.7 导向治疗剂
• 1.1.8 基因治疗
• 1.1.9 抗癌中草药
• 1.2 免疫调节剂的研究
• 1.2.1 免疫系统的功能
• 1.2.2 中药对免疫系统的调节
• 1.3 香鳞毛蕨的研究进展
• 1.3.1 生药性状
• 1.3.2 显微组织
• 1.3.3 药材性状
• 1.3.4 化学成分
• 1.3.5 药理作用
• 1.4 展望
• 第2章 香鳞毛蕨化学成分的分离与鉴定
• 2.1 香鳞毛蕨化学成分分离
• 2.2 化学结构的鉴定
• 2.2.1 化合物3 化学结构的鉴定
• 2.2.2 化合物10 化学结构的鉴定
• 2.2.3 化合物5 化学结构的鉴定
• 2.3 实验部分
• 2.3.1 实验仪器与材料
• 2.3.2 提取
• 2.3.3 分离
• 2.3.4 化合物结构鉴定数据
• 2.3.5 酸水解薄层
• 2.4 本章小结
• 第3章 香鳞毛蕨抗肿瘤活性物质筛选
• 3.1 前言
• 3.2 方法与材料
• 3.2.1 香鳞毛蕨活性部位、分离组分及化合物
• 3.2.2 细胞系
• 3.2.3 主要仪器设备
• 3.2.4 主要试剂
• 3.2.5 主要试剂配制方法
• 3.2.6 细胞培养
• 3.2.7 噻唑蓝（MTT）法测定细胞活性
• 3.2.8 统计学分析
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 香鳞毛蕨大孔树脂组分抗肿瘤活性研究
• 3.3.2 香鳞毛蕨硅胶柱组分抗肿瘤活性研究
• 3.3.3 香鳞毛蕨单体化合物抗肿瘤活性研究
• 3.4 本章小结
• 第4章 香鳞毛蕨免疫调节活性物质筛选
• 4.1 前言
• 4.2 方法与材料
• 4.2.1 实验材料
• 4.2.2 实验动物
• 4.2.3 主要仪器设备
• 4.2.4 主要试剂
• 4.2.5 主要试剂配制方法
• 4.2.6 方法
• 4.2.7 统计学分析
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 香鳞毛蕨大孔树脂组分对淋转实验的促进作用
• 4.3.2 香鳞毛蕨硅胶柱组分对淋转实验的促进作用
• 4.3.3 香鳞毛蕨单体化合物对淋转实验的促进作用
• 4.4 本章小结
• 结论
• 参考文献
• 致谢
• 附录