缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）反义寡核苷酸对宫颈癌细胞增殖的影响

论文摘要

背景:近年来,随着在恶性肿瘤方面的研究不断深入,有学者发现低氧诱导因子-1α（HIF-1α）是介导肿瘤细胞缺氧适应的关键性转录调控因子,并可在基因水平上直接调控血管内皮生长因子（VGEF）的表达,进而促进肿瘤生长。通常,生长较快的肿瘤,其间质血管多较丰富而纤维结缔组织较少,生长缓慢的肿瘤其间质血管则较少。如果没有新生血管供应营养,肿瘤达到1～2 nm的直径或厚度即107个细胞左右将不再增大,因此诱导新生血管生成就成为恶性肿瘤生长、侵袭、转移的前提条件之一。肿瘤细胞的过度增生,而血管生长相对不足引起新生瘤细胞局部相对缺氧,缺氧又反馈性的刺激VEGF表达,促使血管增生为肿瘤进一步发展创造条件。目的:研究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）反义寡核苷酸对人宫颈癌Hela体内生长的影响,观察其对缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,为宫颈癌的发病机理研究提供新的思路与方法,为进一步探讨是否可通过反义寡核苷酸阻断HIF-1α的表达,抑制VEGF蛋白的表达,从而达到为治疗宫颈癌提供重要理论依据的目的。方法:采用裸鼠移植瘤模型,将宫颈癌细胞株Hela制备成浓度为1×108的细胞悬液,种植于18只4～6周龄裸鼠肩部皮下,待肿瘤长至直径达1.0 cm（约20天左右）时,18只裸鼠随机分为3组（每组6只）:对照组（A组）、正义治疗组（B组）、反义治疗组（C组）,分别注射生理盐水,HIF-1α正义寡核苷酸和HIF-1α反义寡核苷酸。注射剂量:100μg/次。用100μl生理盐水稀释后,在瘤体内多点注射,每3天重复注射一次,共8次。注射药物后,每天观察肿瘤生存状态,每3天用游标卡尺测量肿瘤的最长径（a）和最短径（b）,计算肿瘤的体积（V,V=1/6πab2）,绘制皮下肿瘤生长曲线。治疗4周后处死裸鼠,测定肿瘤的重量和体积并计算肿瘤抑制率,应用免疫组化技术检测种植瘤内VEGF和HIF-1α的变化。所得数据应用SPSS11.0系统统计分析软件包进行处理。结果:1、裸鼠体内抑瘤实验显示,缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）反义寡核苷酸（asHIF-1α）有明显的抑瘤作用,肿瘤生长曲线减缓,体积抑制率为33%、瘤重抑制率为54%（P<0.05）;2、免疫组化检测显示,反义治疗组种植瘤内HIF-1α蛋白含量显著降低（P<0.05）;3、免疫组化检测显示,反义治疗组种植瘤内VEGF蛋白含量显著降低（P<0.05）。结论:1、缺氧诱导因子-1α反义寡核苷酸对实验动物荷瘤生长（体积、重量）具有明显的抑制作用。2、其机制是通过抑制HIF-1α蛋白表达,进而抑制VEGF的合成,从而使肿瘤组织的血管形成被抑制。

论文目录

• 一、正文
• （一） 中文摘要
• （二） 英文摘要
• （三） 前言
• （四） 材料和方法
• （五） 结果
• （六） 讨论
• （七） 结论
• （八） 参考文献
• 二、文献综述
• （一） 综述
• （二） 参考文献
• 三、致谢