HBV X基因在HepG2细胞中的转染、表达对凋亡和凋亡途径的影响

论文摘要

目的研究HBV X 基因及其蛋白质产物HBxAg 对人肝癌细胞HepG2的凋亡及其途径的影响。方法用脂质体转染法将HBV X基因真核表达载体pcDNA3-X瞬时转入HepG2细胞,以未转染的HepG2细胞及转染空载体pcDNA3的细胞为对照;分别抽提三组细胞总RNA,RT-PCR 检测HBV X 基因在各组的表达;MTT 法检测三组细胞的增殖活性,TUNEL 法检测各组细胞凋亡情况;以β-actin 为内参,半定量RT-PCR 法检测凋亡相关基因Fas、FasL、Bax、Bcl-xL、c-myc 表达量的变化。结果pcDNA3-X 转染HepG2细胞后,RT-PCR 扩增出HBV X 基因片段,空载体组及正常对照组均未扩增出相应片段。HepG2细胞转染HBV X 基因后,与对照组细胞相比增殖能力明显下降,凋亡增多,差别有统计学意义（P<0.05）;转染HBV X基因的HepG2细胞Fas、FasL、Bax、Bcl-xL、c-myc mRNA 相对表达量均较转染空载体组和未转染质粒组明显增高,差别有统计学意义（P<0.05）。结论成功将HBV X 基因转染入HepG2细胞,并在细胞中表达。转染HBV X 基因可同时上调Fas、FasL、Bax、Bcl-xL、c-myc 表达,促进HepG2细胞的凋亡,并抑制细胞增殖。

论文目录

• 一、 英文缩略表
• 二、 中文摘要
• 三、 英文摘要
• 四、 主要材料和器材
• 五、 前言
• 六、 第一部分 HBV X 基因真核表达载体在 HepG2细胞中的转染及表达
• 七、 第二部分 HBV X 基因对 HepG2细胞增殖、凋亡及其凋亡途径的影响
• 八、 结论
• 九、 参考文献
• 十、 致谢
• 十一、综述 HBx 与 Bcl-2 家族