论文摘要
目的1、测定再生障碍性贫血（AA）患者治疗前后外周血CD4+CD25+CD127low调节性T细胞（Treg）的数量;2、检测AA患者治疗前后外周血Notch1mRNA及Foxp3mRNA的表达水平;3、分析notch1与CD4+CD25+CD127lowTreg细胞的相关性;4、初步探讨Treg细胞在AA发病中的作用及机制。方法1、取37例AA患者（其中包括29例初发患者、14例环孢素（CsA）治疗后恢复期及11例治疗后未恢复期患者）外周血,应用流式细胞术检测其中CD4+CD25+CD127lowT细胞、CD4+CD25+T细胞的数量,并与正常对照比较。2、半定量RT-PCR检测Foxp3 mRNA和Notch1 mRNA的表达水平:Ficoll法分离外周血单个核细胞,提取总RNA,一步法反转录及扩增出Foxp3 mRNA和Notch1mRNA。产物电泳后经凝胶扫描成像系统观察结果并分析Foxp3 mRNA和Notch1mRNA的相对含量。3、采用统计学软件SPSS13.0处理实验数据,并分析CD4+CD25+CD127lowTreg细胞和Notch1 mRNA的相关性。结果1、AA初发组及治疗后未恢复组外周血中活化CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例分别为（4.277%±0.680%）、（4.165%±0.598%）,明显高于正常对照组（2.436%±0.834%）（P＜0.05）。环孢素治疗后恢复期比例显著下降为（2.576%±0.698%）（P＜0.05）,但与对照组比较差异无统计学意义。AA初发组及未恢复组CD4+CD25+CD127lowT细胞/CD4+T细胞分别为（2.368%±1.166%）（2.495%±1.097%）较正常对照组（7.056%±2.676%）及恢复组（5.314%±1.024%）明显降低（P均＜0.01）;但后两组比较差异无统计学意义。2、AA患者Foxp3 mRNA为（0.260±0.011）,较正常对照表达明显下调（P＜0.01）,治疗后为（1.287±0.012）,表达较初发组显著增多（P＜0.01）,与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。3、AA患者Notch1mRNA为（0.018±0.005）,较正常对照表达明显下调（P＜0.01）,治疗后（0.281±0.013）,表达较初发组显著增多（P＜0.01）,与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。4、AA患者CD4+CD25+CD127lowT细胞、Foxp3均与Notch1表达呈正相关性（P均＜0.01）。结论AA患者外周血CD4+CD25+CD127lowTreg细胞减少,其抑制作用减弱,导致自身反应性T细胞过度活化,抑制造血。其作用机制之一可能与靶细胞表面Notch1分子表达降低相关。环孢素A治疗可明显增加Treg细胞的比例,抑制效应性T细胞活化,有利于骨髓造血功能恢复。
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