人鸟氨酸脱羧酶基因的克隆、表达、单抗制备及其初步应用

论文题目: 人鸟氨酸脱羧酶基因的克隆、表达、单抗制备及其初步应用

论文类型: 博士论文

论文专业: 生物化学与分子生物学

作者: 胡海燕

导师: 刘贤锡

关键词: 鸟氨酸脱羧酶,多胺,基因表达,杂交瘤,单克隆抗体,大肠癌

文献来源: 山东大学

发表年度: 2005

论文摘要: 鸟氨酸脱羧酶(Ornithine decarboxylase, ODC)(EC 4.1.1.17)是多胺代谢过程中的第一个限速酶。多胺广泛存在于真核生物细胞中,含有多个碱性的氨基,能与核酸分子相互结合,并促进DNA的生物合成,RNA的转录以及蛋白质的翻译,起到稳定细胞结构、增强核酸和蛋白质的合成的作用,为细胞的增殖提供物质基础从而促进细胞的增殖。凡生长旺盛的组织,如胚胎、再生肝等组织,细胞中多胺的含量均较高。高特异性的多胺合成抑制剂可以干扰非洲爪蟾卵母细胞的激素诱导的ODC活性,随后抑制其减数分裂及排卵。多胺的代谢与肿瘤的发生也有着密切的关系。早期的研究发现,病毒诱导原代成纤维细胞转化时,腐胺和精脒的含量增多。多胺在维持肿瘤细胞恶性表型中也起重要作用,抑制多胺合成可抑制肿瘤细胞增殖并诱导其分化及凋亡,引起肿瘤恶性表型逆转。由于多胺为ODC的产物,因此ODC对细胞的正常发育及异常增殖也起重要作用。 ODC及多胺水平升高几乎是所有种类的癌细胞的特征。用强力的肿瘤促进剂刺激上皮细胞后的早期变化之一就是ODC活性迅速、显著、一过性的诱导升高。ODC的合成受多种因素的影响,激素、生长因子、肿瘤刺激因子、病毒以及癌基因均能诱导ODC的合成,从而使细胞内的多胺水平增加。ODC基因表达可在转录、mRNA的降解、mRNA的翻译、酶蛋白的降解几个水平上进行调控。ODC基因被认为是一个立早基因,其中包含的应答元件可与几种反式作用因子结合,包括cAMP应答元件,胰岛素应答元件及几个Sp1结合位点等。ODC基因的诱导还对多种原癌基因的信号传导具有重要作用,如ras,v-src和myc基因被激活后对细胞的转化过程中常伴随着ODC基因的表达和多胺含量的增加。正常细胞中生长因子对ODC的调节是快速而短暂的,而肿瘤刺激因子、病毒及癌基因对ODC的作用是持续的。这些事实表明细胞内的ODC过度表达伎多胺生物合成增多,可能是细胞过度增殖,最终导致肿瘤发生的重要原因之一。

论文目录:

中文摘要

英文摘要

符号说明

论文正文

前言

第一部分 人 ODC基因的克隆表达和纯化

实验材料

实验方法

结果

讨论

第二部分 抗人 ODC蛋白单克隆抗体的制备、鉴定

实验材料

实验方法

结果

讨论

第三部分 抗人 ODC多克隆抗体及单克隆抗体的初步应用

实验材料

实验方法

结果

讨论

全文总结

参考文献

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攻读博士学位期间在研课题

致谢

学位论文评阅及答辩情况表

发布时间: 2005-10-17

参考文献

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