降血糖色素产生菌的固态发酵条件优化与诱变育种初步研究

论文摘要

从成都山区森林土壤中分离筛选出产吲哚醌色素的丝状真菌F120菌株。菌株生成的吲哚醌色素对四氧嘧啶糖尿病小鼠和地塞米松糖尿病大鼠均表现出显著降低血糖和增加糖耐量作用; 在降血糖幅度,增加糖耐量和增加胰岛素敏感性指数方面,均强于阳性药物罗格列酮。同时吲哚醌色素毒性低,其LD50大于4g/kg。因此,F120菌株产生的吲哚醌色素具有发展成为抗糖尿病口服新药的潜在价值。利用大米固态培养,考察了单因素对菌株F120的色素产量的影响,并通过正交试验确定了F120的最佳固态发酵条件。F120的最佳固态发酵条件为:用籼米制备培养基,并在培养基中添加1%胰蛋白胨（w/w）和0.01% K+（w/w）; 500mL的三角瓶装量30g,初始pH值6.4,温度30℃,培养12天后,色素产量可达1.1315g/kg。以菌株F120为出发菌株进行诱变育种,以期提高吲哚醌色素的产量。以酪蛋白胨为唯一碳源和氮源制备初筛分离平板,挑选平板上菌落周围透明圈的直径与菌落直径的比值（d/D）大的菌落,并进一步挑选在查氏平板和初筛液体培养基中生长快且生物量大的菌株。复筛用大米固态培养基发酵后,乙酸乙酯浸提,通过薄层层析和定量比色法检测吲哚醌色素含量。以菌株F120为出发菌株,经过紫外诱变处理后,筛选到一株突变株F120-Ⅰ16,较出发菌株F120提高34.6%,产量达到0.479g/kg。再以F120-Ⅰ16为出发菌株,通过亚硝基胍诱变处理,筛选到一株突变株F120-Ⅱ31,产量达到0.621g/kg,较出发菌株F120-Ⅰ16提高29.6%,较原始菌株F120提高74.4%。菌株F120-Ⅱ31的吲哚醌色素

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• 引言
• 第一章 吲哚醌色素产生菌F120的固态发酵条件优化
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 实验结果
• 4 讨论
• 第二章 吲哚醌色素的化学研究与动物试验
• 1 吲哚醌色素的化学研究
• 2 吲哚醌色素的动物试验
• 3 讨论
• 第三章 吲哚醌色素产生菌的诱变育种初步研究
• 1 实验材料
• 2 实验方法
• 3 实验结果
• 4 讨论
• 结论
• 参考文献
• 附录
• 降血糖药物的研究进展（综述）
• 发表文章
• 致谢