脑梗死血运重建前后证候演变规律及芎芪合剂干预作用的机制研究

论文摘要

1选题思路和研究目的脑梗死形成原因是由于急性血栓形成,或其它部位的血栓转移,或血管狭窄,导致局部脑血管狭窄甚至闭塞、脑组织缺血缺氧造成的。最重要的治疗就在于通过各种治疗方法使脑血流重建,从而使脑缺血缺氧状态得以纠正。脑梗死血运重建治疗虽能迅速恢复脑部血液供应,但治疗后亦有各种各样的并发症。目前西医对血运重建治疗后并发症的防治措施,大多仅针对单一环节或单一因素,缺乏系统的协同作用,难以取得满意的疗效。因此,充分发挥中医药注重整体调节和多环节综合治疗的优势,寻求能够防治血运重建后并发症的有效方药,具有十分重要的意义。本课题根据广东省中医院首席科学家王永炎院士的经验思路,在导师指导下,首先对现代医学血运重建治疗在缺血性脑血管病中的应用及其常见并发症的研究进展进行综述,并在此基础上从中医思维方式出发,提出中医药干预脑梗死血运重建后并发症的辨证治疗思路,进而设计中风病中医证候调查表,对脑梗死患者血运重建治疗前后的中医证候进行调查,探讨脑梗死患者血运重建前后的证候演变规律。同时,采用益气活血的治疗法则,选取中药的有效部位组成芎芪合剂,建立脑梗死血运重建治疗后的动物模型之一——大鼠急性脑缺血溶栓后再灌注损伤模型,从氧化应激、氨基酸兴奋毒性作用、免疫与炎症反应等方面,深入探讨中药抗溶栓状态下脑缺血再灌注损伤的可能作用机制,从而为中医药在临床上更好地预防及早期有效治疗脑梗死患者血运重建后并发症提供有益探索。2研究方法2.1临床证候调查研究采用横断面调查研究方法,设计中风病中医证候调查表,分别对脑梗死患者血运重建治疗前0-3天、治疗后1-3天、14±3天、30±3天、60±3天、90±3天6个时点进行前瞻性调查,系统研究脑梗死患者血运重建治疗前后的常见证候、变化规律以及两种不同血运重建治疗方式在证候演变方面存在的差异。2.2动物实验研究建立脑梗死血运重建治疗后的主要动物模型之一——大鼠急性脑缺血溶栓后再灌注损伤模型,运用组织生化检测、病理HE染色、免疫组化的方法,进行氧化应激相关指标测定:SOD、MDA含量测定;氨基酸相关指标测定:Glu、Asp、Gln、Gaba含量测定;免疫与炎症反应相关指标测定:MPO含量、ICAM-1蛋白表达测定。进而分析芎芪合剂干预溶栓后脑缺血再灌注损伤的可能作用机制。3研究结果3.1临床证候调查研究3.1.1脑梗死患者血运重建治疗前后中医证候演变规律3.1.1.1证候在不同时段的组合及分布规律脑梗死患者血运重建治疗前证型分布以风+痰+瘀、风+痰+瘀+火、风+痰+瘀+气虚等实证相关证候组合为多见。此后随着病情进展,由较多证候组合（3、4证组合）类型转向较少证候组合（1、2、3证组合）类型,并且从实证相关证候组合为主向以虚证相关证候组合为主转变。3.1.1.2单一证候在脑梗死血运重建治疗前后的演变情况脑梗死患者血运重建治疗后,风、火、痰、瘀等邪实证候均呈下降趋势,除风证、火热证可能为中风病自然病程演变所致外,血瘀证、痰证下降亦很明显,尤以血瘀证为著,而气虚、阴虚等本虚证候则呈明显上升趋势,提示血运重建治疗在发挥祛除实邪（主要为血瘀、痰邪）作用的过程中,可能同时对人体正气产生了一定的损伤作用。3.1.1.3单一证候在脑梗死血运重建治疗前后的积分变化情况除风证、火热证、痰证、阴虚阳亢证在治疗前后1-3天内无明显变化外,其余治疗后各时点的所有证候与治疗前相比较均有所变化。其中血瘀证在血运重建治疗后相关症状逐渐得到改善;而风证、火热证、痰证在治疗后1-3天内与治疗前相比较无明显改善,但在治疗后14±3天及以后其它各时点均较治疗前有明显改善。气虚证在血运重建治疗后各时点均较治疗前加重。阴虚阳亢证在治疗后14±3天及之后各时点也较治疗前加重。3.1.2不同血运重建治疗方法之间中医证候演变规律的差异两组患者气虚、火热、血瘀、痰证、阴虚阳亢等证在血运重建治疗前后各时点的分布基本相同。而风证在血运重建治疗前及治疗后1-3天内溶栓治疗组较血管成形术治疗组明显,这可能与溶栓治疗组患者多处于脑梗塞急性期,病情不稳定有关;而血管成形术治疗组患者多处于脑梗塞恢复期,病情相对稳定,故风证不如溶栓治疗组明显。3.2动物实验研究3.2.1芎芪合剂对脑缺血再灌注后氧化应激损伤的影响作用芎芪合剂能够调节MCAO大鼠缺血再灌注引起的缺血侧脑组织中SOD、MDA的含量,并使之趋向于正常;尿激酶则没有此作用,而尿激酶加用芎芪合剂与单用芎芪合剂作用相似。提示芎芪合剂能够通过减轻氧化应激损伤的程度达到抗脑缺血再灌注损伤的作用。3.2.2芎芪合剂对脑缺血再灌注后免疫炎症损伤的影响作用芎芪合剂能够抑制MCAO大鼠缺血再灌注引起的缺血侧脑组织中MPO含量的增高;HE染色缺血侧脑组织芎芪合剂组白细胞粘附及浸润的程度明显减轻,芎芪合剂还能抑制缺血再灌注引起的ICAM-1蛋白表达的增高;尿激酶则没有此作用,而尿激酶加用芎芪合剂与单用芎芪合剂作用相似。提示芎芪合剂能够通过减轻免疫炎症损伤的程度达到抗脑缺血再灌注损伤的作用。3.2.3芎芪合剂对脑缺血再灌注后氨基酸兴奋毒性的影响作用芎芪合剂能够抑制MCAO大鼠缺血再灌注引起的缺血侧脑组织中兴奋性氨基酸Glu、Asp含量的增高,并使之趋向于正常;芎芪合剂还能协同增高大鼠缺血侧脑组织中抑制性氨基酸Gln、Gaba含量。提示芎芪合剂能够通过调整兴奋性氨基酸和抑制性氨基酸含量,达到减轻缺血再灌注后兴奋毒性损伤的作用。尿激酶可导致缺血再灌注后的抑制性氨基酸Gln、Gaba含量减低,提示尿激酶在一定程度上抑制了机体对再灌注损伤自我修复的能力。而尿激酶加用芎芪合剂与单用芎芪合剂作用相似,还能减轻尿激酶导致的缺血再灌注后Gln、Gaba含量降低,提示芎芪合剂能够减轻尿激酶对机体再灌注损伤自我修复能力的抑制。4研究结论4.1临床证候调查研究脑梗死患者血运重建治疗前后证候演变规律为:由治疗前较多证候组合（3、4证组合）类型转向治疗后较少证候组合（1、2、3证组合）类型,并且从实证相关证候组合为主向以虚证相关证候组合为主转变。提示血运重建治疗在发挥祛除实邪（主要为血瘀、痰邪）作用的过程中,可能同时对人体正气产生了一定的损伤作用。4.2动物实验研究急性脑梗死溶栓后再灌注损伤是血运重建治疗后主要并发症之一,芎芪合剂可通过对脑缺血再灌注后氧化应激损伤、免疫与炎症反应、氨基酸兴奋毒性作用等方面的影响,从而对溶栓后脑缺血再灌注损伤可能产生一定的保护作用。5今后方向在本项研究的基础上,扩大临床调查样本数量及范围,继续深入探讨脑梗死患者血运重建治疗前后证候分布及演变规律,为今后辨证论治解决脑梗死患者血运重建治疗后并发症提供方法和思路。进而可在临床上开展芎芪合剂防治脑梗死患者血运重建治疗后相关并发症的随机对照试验,为从中医药防治脑梗死患者血运重建治疗后并发症进行有益的探索。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 引言
• 第一部分 文献研究
• 1 血运重建治疗在缺血性脑血管病中的应用
• 1.1 动脉或静脉溶栓治疗在急性脑梗死中的应用
• 1.2 颅内外血管成形术在缺血性脑血管病中的应用
• 2 血运重建治疗后并发症的研究进展
• 2.1 动静脉溶栓后并发症的研究进展
• 2.2 颅内外血管成形术后并发症的研究进展
• 3 中医药干预脑梗死血运重建后并发症的思路探讨
• 3.1 中医对脑梗死及血运重建后并发症病因病机的认识
• 3.2 脑梗死血运重建后并发症的中药选择
• 4 小结
• 第二部分 临床研究部分——脑梗死患者血运重建前后中医证候演变规律的研究
• 1 临床研究设计方案
• 2 中医证候调查表的设计
• 3 病例来源
• 4 病例选择
• 4.1 诊断标准
• 4.2 纳入标准
• 4.3 排除标准
• 5 统计分析方法
• 6 技术路线图
• 7 结果与分析
• 7.1 一般资料
• 7.2 中风危险因素分布情况
• 7.3 病例脱落情况
• 7.4 脑梗死患者血运重建治疗前后中医证候演变规律
• 7.5 不同血运重建治疗方法之间中医证候演变规律的差异
• 8 讨论
• 8.1 中风病病因病机
• 8.2 脑梗死血运重建治疗前后基本证候特征及辨证治疗思路
• 第三部分 动物实验部分——芎芪合剂对MCAO大鼠脑缺血再灌注损伤干预作用的机制研究
• 实验一 芎芪合剂对MCAO再灌注后大鼠脑组织中SOD、MDA、MPO含量的影响
• 1 材料和方法
• 2 结果与分析
• 实验二 芎芪合剂对MCAO再灌注后大鼠脑组织中氨基酸含量的影响
• 1 材料与方法
• 2 结果与分析
• 实验三 芎芪合剂对MCAO再灌注后大鼠脑组织病理形态学及ICAM-1蛋白表达的影响
• 1 材料与方法
• 2 结果与分析
• 讨论
• 结语
• 参考文献
• 附录
• 附录1 中风病辨证诊断标准
• 附录2 中风病中医病名诊断标准
• 附录3 西医:动脉粥样硬化性血栓性脑梗塞诊断要点
• 附录4 动物实验图片
• 附录5 英文缩略词表
• 研究生在学期间发表论文情况
• 致谢