论文摘要
目的:1.通过观察正常大鼠足底注射CFA炎性疼痛模型行为学改变和脊髓TNF-α的免疫组织化学,研究CFA所致炎性疼痛的特点和TNF-α表达的时程变化。2.观察鞘内及腹腔注射抗TNF-α受体单克隆抗体依那西普（Etanercept）对大鼠CFA所致炎性疼痛的影响,探讨TNF-α在CFA所致炎性疼痛中的作用,并为此药以后的临床应用提供科学依据。3.观察神经阻滞试验对脊髓TNF-α表达的影响,研究细胞因子等炎症介质的传入方式。方法:1.健康成年雄性SD大鼠48只,随机分六组（1h、3h、1d、3d、7d、14d,n=8）。左足注射CFA后,在各时间点测大鼠左足50%缩足阈值。行为学测试完毕后,取大鼠胸、腰段脊髓,腰段为与坐骨神经相连节段。用免疫组织化学方法检测TNF-α表达的变化。2.健康成年雄性SD大鼠48只,随机分为八组（n=6）。A组,腹腔注射NS;B组,腹腔注射Etanercept;C组,腹腔注射NS,足底注射CFA;D组,腹腔注射Etanercept,足底注射CFA;E组,鞘内注射NS,足底不注射CFA;F组,鞘内注射Etanercept,足底不注射CFA;G组,鞘内注射NS,足底注射CFA;H组,鞘内注射Etanercept,足底注射CFA。在各时间点测大鼠左足50%缩足阈值。3.健康成年雄性SD大鼠8只,在大鼠足底注射CFA之前10分钟进行坐骨神经阻滞。3小时后取大鼠胸、腰段脊髓,腰段为与坐骨神经相连节段,用免疫组织化学方法检测TNF-α的表达。结果:1.CFA致痛后各时间点大鼠痛阈均显著低于致痛前（P＜0.05）,其中以致痛后1天痛阈降低最为显著,以后痛阈逐渐升高,14天后痛阈恢复至基础值的60%左右。大鼠足底注射CFA后3小时TNF-α表达较对侧低（p＜0.05）,TNF-α表达的峰值在足底注射CFA后第三天。注射后14天,TNF的表达与空白组接近。通过免疫双标观察,TNF-α主要表达在神经元上,星形胶质细胞和小胶质细胞有少量表达。2.腹腔注射和鞘内注射Etanercept均可减轻CFA致痛大鼠的痛阈（P＜0.05）,两者间无明显差异（P＞0.05）。3.坐骨神经阻滞后大鼠脊髓TNF-α阳性细胞光密度（optic density,OD）与对照侧相比有统计学差异（P＜0.05）,与未进行坐骨神经阻滞的CFA致痛大鼠致痛侧相比无明显统计学差异（P＞0.05）。结论:1:CFA致痛大鼠可引起行为学和脊髓后角的TNF-α表达呈特定的时空模式。2:腹腔注射和鞘內注射Etanercept均可减轻CFA致痛大鼠的痛阈,说明TNF-α在外周致敏和中枢致敏均起作用。3:坐骨神经阻滞不能降低脊髓TNF-α的表达,说明脊髓TNF-α的上调可能不依赖于传入神经的动作电位。
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