类风湿性关节炎患者外周血PD-1/PD-L1协同抑制分子的表达及意义

论文摘要

研究背景:类风湿关节炎（rheumatoid arthritis,RA）是一种以滑膜炎、关节软骨和骨进行性破坏为特征的自身免疫性疾病,致残率高,其发病机制至今尚未完全明了。近年来的研究发现,共刺激分子的多对受体-配体分子在免疫应答的不同时期,以不同的方式参与了自身免疫性疾病的病理过程。程序性死亡配体-1（PD-1）属于CD28超家族成员,程序性死亡受体-1（PD-L1）是B7家族成员之一,作为一对新近发现的负性协同刺激分子,在多种自身免疫性疾病中得到广泛研究。因此,研究类风湿关节炎患者外周血中PD-1/PD-L1的表达特性,分析其与各临床实验指标之间的关系,并探讨其生物学意义,有助于阐明RA可能的发病机制,并为类风湿关节炎提供新的治疗靶点。目的:探讨协同抑制分子PD-1/PD-L1在类风湿关节炎患者外周血中的表达及其临床意义。方法:选取本院门诊及住院的56例类风湿关节炎患者作为试验组:其中活动期患者29例,缓解期患者27例,分别记录所有RA患者的诊断性指标如类风湿因子（RF）、抗环瓜氨酸多肽（CCP）抗体,疾病活动性指标如肿胀关节数、压痛关节数和血沉（ESR）、C-反应蛋白（CRP）,及相关临床指标如患者的疼痛评分（VAS）、晨僵时间、健康问卷评价（HAQ）、疾病活动性评分（DAS）等;另取本院门诊健康体检者20例作为对照组。分离出56例患者及20例健康者的外周血单个核细胞（PBMC）,应用流式细胞仪（FCM）分别检测PBMC上CD4+PD-1+、CD8+PD-1+、CD14+PD-L1+、CD19+PD-L1+双阳性细胞百分比,并分析各相关分子与RA各项指标之间的相关性。结果:（1）在试验组中,56例RA患者外周血PBMC上PD-1信号的表达率为（16.74±6.67）%,明显高于对照组的（13.25±2.71）%,差异有显著性（P<0.05）。（2）试验组中,56例RA患者PBMC上CD4+PD-1+的细胞表达率为（9.80±5.28）%,明显高于对照组的（5.94±1.41）%,差异有显著性（P<0.05）;两者CD14+PD-L1+的细胞表达率分别为（32.63±16.08）%、（21.99±6.68）%,差异有显著性（P<0.05）。（3）试验组中,29例RA活动组与27例RA缓解组患者的CD4+PD-1+、CD8+PD-1+、CD14+PD-L1+、CD19+PD-L1+的细胞百分率之间均无显著性差异（P>0.05）。（4）试验组外周血中PD-1在T细胞上的表达与RF、抗CCP抗体均呈显著正相关（r=0.325, P<0.05;r=0.424, P<0.05）,而与患者年龄、病程、肿痛关节数、晨僵时间、DAS、VAS、HAQ评分、ESR、CRP均无相关性（P>0.05）。（5）PD-L1在CD14+单核细胞和CD19+B淋巴细胞上的表达与患者年龄、病程、肿痛关节数、晨僵时间、DAS、VAS、HAQ评分、RF、抗CCP、ESR、CRP均无相关性（P>0.05）。结论:类风湿关节炎患者PBMC上CD4+T细胞及CD14+单核细胞上PD-1/PD-L1分子表达异常增高,PD-1主要表达在CD4+T淋巴细胞,PD-L1主要在CD14+单核细胞上表达,说明PD-1/PD-L1这对共刺激分子可能参与类风湿关节炎的发病;并且PD-1在T淋巴细胞上的表达与诊断性指标RF、抗CCP抗体均呈显著正相关,而与疾病活动指标如ESR、CRP之间无相关性,提示PD-1信号通路可能贯穿RA疾病的病程始终,PD-1可能作为诊断RA的一项免疫学指标,但却不能用来反映RA病情的活动性。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 资料与方法
• 一、资料
• 二、方法
• 结果
• 一、类风湿关节炎患者外周血淋巴细胞亚群的异常变化
• 二、类风湿关节炎患者外周血 PBMC 上共刺激分子 PD-1/PD-L1 的表达
• 三、类风湿关节炎患者外周血中 PD-1 在 T 细胞上的表达与 RA 各项临床实验指 标之间的相关性分析
• 五、类风湿关节炎患者 PBMC 上 PD-L1 的表达与 RA 各临床实验指标之间的相 关性分析
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 参考文献
• 英文缩写词表
• 攻读学位期间公开发表的论文
• 本课题资助项目
• 致谢