肥胖与非肥胖女性内脏脂肪组织差异蛋白质组学研究

肥胖与非肥胖女性内脏脂肪组织差异蛋白质组学研究

论文摘要

超重和肥胖在全世界范围内已成为影响人类健康、社会发展的重要问题,与2型糖尿病、心脑血管疾病、血脂紊乱等疾病的发生有密切关系。脂肪组织不仅是能量储存器官,更是重要的内分泌器官。目前关于脂肪组织功能的研究中,蛋白质组学是其中的重要部分。本研究以肥胖以及体重正常的女性对研究对象,收集内脏脂肪组织,提取总蛋白,根据SDS-PAGE蛋白条带均一性分别选择样品混合后进行1DLC-MS/MS分离鉴定。串联质谱鉴定结果应用MASCOT软件进行数据库检索,鉴定出相关多肽和蛋白,同时应用反向数据库搜索法评价假阳性率。蛋白质数据库为从欧洲生物信息学院网站(http://www.ebi.ac.uk/IPI/)下载的人类蛋白质数据库。对照组共鉴定出1445种肽和蛋白,理论分子量分布于4.066kD-629.213kD,理论等电点分布于3.94-11.89。肥胖组共鉴定出1288种肽和蛋白,理论分子量分布于3.268kD-3832.803kD,理论等电点分布于3.94-12.18。比较肥胖组与对照组蛋白质组表达谱结果,找到在两组中表达量相差2倍以上的蛋白54种。其中已在蛋白水平得到证实的蛋白51种,其余3种在转录水平得到证实。肥胖组含量较低的蛋白34种,其中6种蛋白为对照组特有;肥胖组含量较高的蛋白20种,4种蛋白为肥胖组特有。差异蛋白中代谢相关蛋白23种,涉及糖脂代谢、能量代谢、蛋白质分解与合成等多种代谢途径,对这些差异蛋白做进一步研究可能解释肥胖与2型糖尿病、脂质紊乱等相关疾病的具体关系。下一步可应用本研究的方法在男性和女性群体中对内脏脂肪及腹部皮下脂肪进行类似研究,以全面描绘出内脏和腹部皮下脂肪组织的蛋白质组表达谱。

论文目录

  • 缩略词表
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 引言
  • 实验材料
  • 一、研究对象及标本来源
  • 二、化学试剂和材料
  • 三、主要仪器和设备
  • 四、溶液配制
  • 实验方法
  • 一、收集大网膜脂肪组织
  • 二、提取脂肪组织总蛋白
  • 三、Bradford法检测蛋白浓度
  • 四、SDS-PAGE
  • 五、蛋白酶切
  • 六、固相萃取
  • 七、1DLC-MS/MS
  • 八、数据处理
  • 九、研究流程
  • 实验结果
  • 一、研究对象一般资料
  • 二、蛋白质浓度测定及SDS-PAGE
  • 三、1DLC-MS/MS
  • 1. 数据结果汇总
  • 2. 平行组内结果相关性及差异分布
  • 3. 组间差异分布
  • 4. 全谱结果
  • 5. 差异蛋白
  • 讨论
  • 一、实验方法
  • 二、人类大网膜脂肪组织的蛋白质全谱
  • 三、肥胖和非肥胖者内脏脂肪组织蛋白质组的差异比较
  • 结论
  • 局限性和展望
  • 参考文献
  • 附录
  • 综述
  • 参考文献
  • 致谢
  • 相关论文文献

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    • [4].小麦磷饥饿前后根系蛋白质组差异表达谱建立及差异表达蛋白的鉴定[J]. 作物学报 2012(05)
    • [5].基于双向凝胶电泳技术的中医寒、热体大鼠蛋白质组表达谱研究[J]. 世界科学技术-中医药现代化 2015(10)
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    • [7].曲古抑菌素A刺激肝癌细胞株HepG2的蛋白质组学分析[J]. 泸州医学院学报 2011(02)
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