本文主要研究内容
作者赵冠宇,黄海鑫,张世亨,赵翠青,陆祎婷,夏秀秀,倪铭,李笨,汪伟,曹亮,郑敏,孙文超,鲁会军,金宁一(2019)在《猪肠道α冠状病毒荧光定量PCR检测方法的建立》一文中研究指出:为建立猪肠道α冠状病毒(SeACoV)荧光定量检测方法,本研究采用RT-PCR方法扩增SeACoV N基因保守区序列,将其克隆至p EASY-Blunt载体,构建重组质粒p EASY-Blunt-PA-N作为标准阳性质粒,以其为模板建立SeACoV的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法,并进行特异性、敏感性和重复性试验验证。结果显示,建立的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法 Ct值与标准品模板在9.47×101拷贝/μL~9.47×107拷贝/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.996,斜率为-3.91。本实验建立的方法对PEDV、TGEV、PDCo V、PRRSV等猪常见腹泻病样品检测无扩增,表明特异性良好;敏感性试验结果显示,该方法检测下限可达到9.47×101拷贝/μL;重复性试验结果显示,组内变异系数在0.82%~1.01%,组间变异系数在1.20%~1.69%,重复性较好。采用本研究建立的方法对广西和云南等地70份临床样品进行检测,结果显示除阳性对照外,临床样品均为阴性,表明该病毒尚未传播至广东以外的省份。本实验首次建立了SeACoV N基因SYBR Green I荧光定量PCR检测方法,为SeACoV快速检测和病毒感染预防提供技术手段。
Abstract
wei jian li zhu chang dao αguan zhuang bing du (SeACoV)ying guang ding liang jian ce fang fa ,ben yan jiu cai yong RT-PCRfang fa kuo zeng SeACoV Nji yin bao shou ou xu lie ,jiang ji ke long zhi p EASY-Bluntzai ti ,gou jian chong zu zhi li p EASY-Blunt-PA-Nzuo wei biao zhun yang xing zhi li ,yi ji wei mo ban jian li SeACoVde SYBR Green Iying guang ding liang PCRjian ce fang fa ,bing jin hang te yi xing 、min gan xing he chong fu xing shi yan yan zheng 。jie guo xian shi ,jian li de SYBR Green Iying guang ding liang PCRjian ce fang fa Ctzhi yu biao zhun pin mo ban zai 9.47×101kao bei /μL~9.47×107kao bei /μLfan wei nei cheng liang hao de xian xing guan ji ,xiang guan ji shu wei 0.996,xie lv wei -3.91。ben shi yan jian li de fang fa dui PEDV、TGEV、PDCo V、PRRSVdeng zhu chang jian fu xie bing yang pin jian ce mo kuo zeng ,biao ming te yi xing liang hao ;min gan xing shi yan jie guo xian shi ,gai fang fa jian ce xia xian ke da dao 9.47×101kao bei /μL;chong fu xing shi yan jie guo xian shi ,zu nei bian yi ji shu zai 0.82%~1.01%,zu jian bian yi ji shu zai 1.20%~1.69%,chong fu xing jiao hao 。cai yong ben yan jiu jian li de fang fa dui an xi he yun na deng de 70fen lin chuang yang pin jin hang jian ce ,jie guo xian shi chu yang xing dui zhao wai ,lin chuang yang pin jun wei yin xing ,biao ming gai bing du shang wei chuan bo zhi an dong yi wai de sheng fen 。ben shi yan shou ci jian li le SeACoV Nji yin SYBR Green Iying guang ding liang PCRjian ce fang fa ,wei SeACoVkuai su jian ce he bing du gan ran yu fang di gong ji shu shou duan 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国预防兽医学报的赵冠宇,黄海鑫,张世亨,赵翠青,陆祎婷,夏秀秀,倪铭,李笨,汪伟,曹亮,郑敏,孙文超,鲁会军,金宁一,发表于刊物中国预防兽医学报2019年01期论文,是一篇关于猪肠道冠状病毒论文,基因论文,荧光定量论文,中国预防兽医学报2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国预防兽医学报2019年01期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。
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