赵冠宇:猪肠道α冠状病毒荧光定量PCR检测方法的建立论文

赵冠宇:猪肠道α冠状病毒荧光定量PCR检测方法的建立论文

本文主要研究内容

作者赵冠宇,黄海鑫,张世亨,赵翠青,陆祎婷,夏秀秀,倪铭,李笨,汪伟,曹亮,郑敏,孙文超,鲁会军,金宁一(2019)在《猪肠道α冠状病毒荧光定量PCR检测方法的建立》一文中研究指出:为建立猪肠道α冠状病毒(SeACoV)荧光定量检测方法,本研究采用RT-PCR方法扩增SeACoV N基因保守区序列,将其克隆至p EASY-Blunt载体,构建重组质粒p EASY-Blunt-PA-N作为标准阳性质粒,以其为模板建立SeACoV的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法,并进行特异性、敏感性和重复性试验验证。结果显示,建立的SYBR Green I荧光定量PCR检测方法 Ct值与标准品模板在9.47×101拷贝/μL~9.47×107拷贝/μL范围内呈良好的线性关系,相关系数为0.996,斜率为-3.91。本实验建立的方法对PEDV、TGEV、PDCo V、PRRSV等猪常见腹泻病样品检测无扩增,表明特异性良好;敏感性试验结果显示,该方法检测下限可达到9.47×101拷贝/μL;重复性试验结果显示,组内变异系数在0.82%~1.01%,组间变异系数在1.20%~1.69%,重复性较好。采用本研究建立的方法对广西和云南等地70份临床样品进行检测,结果显示除阳性对照外,临床样品均为阴性,表明该病毒尚未传播至广东以外的省份。本实验首次建立了SeACoV N基因SYBR Green I荧光定量PCR检测方法,为SeACoV快速检测和病毒感染预防提供技术手段。

Abstract

wei jian li zhu chang dao αguan zhuang bing du (SeACoV)ying guang ding liang jian ce fang fa ,ben yan jiu cai yong RT-PCRfang fa kuo zeng SeACoV Nji yin bao shou ou xu lie ,jiang ji ke long zhi p EASY-Bluntzai ti ,gou jian chong zu zhi li p EASY-Blunt-PA-Nzuo wei biao zhun yang xing zhi li ,yi ji wei mo ban jian li SeACoVde SYBR Green Iying guang ding liang PCRjian ce fang fa ,bing jin hang te yi xing 、min gan xing he chong fu xing shi yan yan zheng 。jie guo xian shi ,jian li de SYBR Green Iying guang ding liang PCRjian ce fang fa Ctzhi yu biao zhun pin mo ban zai 9.47×101kao bei /μL~9.47×107kao bei /μLfan wei nei cheng liang hao de xian xing guan ji ,xiang guan ji shu wei 0.996,xie lv wei -3.91。ben shi yan jian li de fang fa dui PEDV、TGEV、PDCo V、PRRSVdeng zhu chang jian fu xie bing yang pin jian ce mo kuo zeng ,biao ming te yi xing liang hao ;min gan xing shi yan jie guo xian shi ,gai fang fa jian ce xia xian ke da dao 9.47×101kao bei /μL;chong fu xing shi yan jie guo xian shi ,zu nei bian yi ji shu zai 0.82%~1.01%,zu jian bian yi ji shu zai 1.20%~1.69%,chong fu xing jiao hao 。cai yong ben yan jiu jian li de fang fa dui an xi he yun na deng de 70fen lin chuang yang pin jin hang jian ce ,jie guo xian shi chu yang xing dui zhao wai ,lin chuang yang pin jun wei yin xing ,biao ming gai bing du shang wei chuan bo zhi an dong yi wai de sheng fen 。ben shi yan shou ci jian li le SeACoV Nji yin SYBR Green Iying guang ding liang PCRjian ce fang fa ,wei SeACoVkuai su jian ce he bing du gan ran yu fang di gong ji shu shou duan 。

论文参考文献

  • [1].猪肠道冠状病毒——全球养猪业的共同威胁[J]. 黎先伟.  兽医导刊.2015(05)
  • [2].猪肠道冠状病毒病的威胁将卷土重来[J]. 本刊辑.  中国猪业.2015(02)
  • [3].猪δ冠状病毒检测方法研究进展[J]. 龙云凤,王毅谦,姜珊,苏志同,李寒玲,吴绍强,姜焱.  畜牧与兽医.2017(03)
  • [4].猪德尔塔冠状病毒病的综合防治措施[J]. 张永香,陈海南.  兽医导刊.2017(01)
  • [5].猪德尔塔冠状病毒侵入宿主细胞的途径:内吞体途径和细胞膜途径[J]. Zhang Jia-lin,Chen Jian-fei,Shi Da.  中国预防兽医学报.2019(06)
  • [6].日本猪δ冠状病毒的遗传特征及致病性[J]. 杜皓云.  兽医导刊.2018(09)
  • [7].猪δ冠状病毒M基因RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 逄凤娇,张柏猛,何孔旺,俞正玉,徐向伟,郭容利,范宝超,温立斌,李彬,姜平.  畜牧与兽医.2016(09)
  • [8].研究发现一种新型猪冠状病毒源自蝙蝠[J]. 张家伟.  农业知识.2018(24)
  • [9].猪δ冠状病毒的病原学特征及检测技术研究进展[J]. 庄金秋,梅建国,张颖,杨丽梅,李峰.  养猪.2019(01)
  • [10].从腹泻的马驹粪便中分离的冠状病毒的特征[J]. 霍惠玲,陆慧君,王增利,刘立国.  河北畜牧兽医.2003(09)
  • 读者推荐
  • [1].吉林磐石新分离株PCV2全基因克隆及Cap蛋白B细胞抗原表位预测[J]. 苗丽娟,尹柏双,张立春,刘东旭.  吉林农业科技学院学报.2018(04)
  • [2].猪圆环病毒2型吉林分离株的全基因组序列分析[J]. 苗丽娟,刘东旭,尹柏双.  中国兽医杂志.2018(11)
  • [3].CDKN1A、CDKN1B基因在蛋鸡等级前卵泡组织中的时空表达模式研究[J]. 陈晓霞.  中国家禽.2019(04)
  • [4].山羊Th1/Th2细胞因子实时荧光定量检测方法的建立[J]. 孙文超,张世亨,易驰喆,黄海鑫,张红云,汪伟,曹亮,闭璟珊,郑敏,鲁会军,韦显凯,苏姣秀,赵翠青,陈征,王茂鹏.  中国人兽共患病学报.2019(02)
  • [5].噬菌体展示布鲁氏菌基因文库插入效率鉴定[J]. 于凌娇,张履冰,王阔鹏,刘倩宏.  吉林农业科技学院学报.2019(01)
  • [6].吉林市江南公园非洲狮寄生虫感染情况及防治[J]. 李沐森,郭蕊,张桂荧,王佟,刘智慧,李世关,贾欣月,赵传芳.  特种经济动植物.2019(07)
  • [7].绵羊胎盘生长因子基因可变剪切异构体克隆与表达分析[J]. 张立春,李梦姝,柳俭强,云巾宴,曹阳,朴庆林,金海国.  聊城大学学报(自然科学版).2019(06)
  • [8].不同蜜粉源植物蜂王浆抗菌作用的初步研究[J]. 林天星,刘瀚弛,王梦琦,王光高,彭建华,李文倩,张猛,王璐莹,林焱.  蜜蜂杂志.2019(09)
  • [9].猪细环病毒研究进展[J]. 曲歌,苗丽娟,王欣茹,谢晓薇,于丽敏,刘东旭.  吉林畜牧兽医.2018(08)
  • [10].华支睾吸虫抗原CsSQ1和CsSQ2的免疫学虫体定位[J]. 孙青松,于妮娜,尚信池,钱瑞程,李国江,刘明远.  中国兽医科学.2017(10)
  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自中国预防兽医学报的赵冠宇,黄海鑫,张世亨,赵翠青,陆祎婷,夏秀秀,倪铭,李笨,汪伟,曹亮,郑敏,孙文超,鲁会军,金宁一,发表于刊物中国预防兽医学报2019年01期论文,是一篇关于猪肠道冠状病毒论文,基因论文,荧光定量论文,中国预防兽医学报2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自中国预防兽医学报2019年01期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

    标签:;  ;  ;  ;  

    赵冠宇:猪肠道α冠状病毒荧光定量PCR检测方法的建立论文
    下载Doc文档

    猜你喜欢