E2F-1在胃癌中的突变、表达和功能的研究

论文摘要

目的: 检测E2F-1在胃癌中的基因突变情况、表达情况,观察E2F-1对胃癌细胞的影响,了解E2F-1与胃癌之间的联系,探寻E2F-1参与胃癌发生、发展的可能途径和作用。方法: 采用聚合酶链式反应-单链构像多态性分析法（PCR-SSCP）,检测80 例胃癌组织、80 例癌旁正常组和40 例正常对照组的E2F-1 基因突变情况。采用免疫组化实验方法了解E2F-1 在胃癌组、癌旁正常组和正常对照组中的表达情况,并联系各类临床病理特征,进行统计学分析。构建E2F-1 真核表达载体,转染MKN-45 人胃癌细胞株;并通过克隆形成实验、MTS 法绘制细胞生长曲线,观察E2F-1 过表达对MKN-45 细胞的影响。结果: 在胃癌组、癌旁正常组和正常对照组均未发现E2F-1基因突变或缺失。胃癌组中E2F-1的阳性表达率为72.5%（58/80）,癌旁正常组和正常对照组的E2F-1阳性表达率分别为30.0%（24/80）和22.5%（9/40）。胃癌组E2F-1阳性表达率明显较癌旁正常组和正常对照组高,差异有显著性（P<0.01）。E2F-1的表达情况在不同的病理类型、有无淋巴结转移和不同的临床分期之间阳性表达率大致接近,经检验各组差异无显著性（P>0.05）。与转染空质粒组相比,转染了E2F-1的MKN-45细胞生长收到明显抑制。结论: 1、E2F-1在胃癌的发生发展过程中有可能是一个非常稳定、保守的基因,突变发生率极低。2、E2F-1的过表达与胃癌的发生发展的存在密切关联,其表达情况与各类临床病理特征之间没有必然联系。E2F-1可能在肿瘤形成后一直处于过表达状态,不因肿瘤临床分期进展而发生变化。3、E2F-1过表达能抑制胃癌细胞MKN-45生长。

论文目录

• 一、E2F-1 在胃癌中的突变、表达和作用方式的研究
• （一） 摘要
• 1. 中文摘要
• 2. 英文摘要
• （二） 前言
• （三） 材料与方法
• 1. 标本采集
• 2. 突变点分析
• 3. 免疫组化实验
• 4. E2F-1 真核表达载体的构建和转染
• （四） 结果
• （五） 讨论
• 1.E 2F-1 的基因突变与胃癌
• 2.E 2F-1 在胃癌组织中过表达
• 3.E 2F-1 过表达胃癌细胞的影响
• （六） 结论
• （七） 参考文献
• 二、细胞周期相关转录因子 E2F-1 研究进展（综述）
• 1. E2F-1 的来源及其基本情况
• 2. E2F-1 与细胞周期调控
• 3. E2F-1 与细胞凋亡
• 4. E2F-1 与DNA 损伤
• 5. E2F-1 在肿瘤中的表现
• 6. E2F-1 和基因突变理论
• 7. 问题与展望
• 参考文献
• 致谢