双黄连粉针剂对产ESBLs大肠埃希菌的体外抑制作用的实验研究

论文摘要

近年来,由于三代头孢菌素等超广谱β-内酰胺类抗生素在临床上的广泛应用,使细菌的耐药机制发生了新的变化,细菌产生了由质粒介导的超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）,可使β-内酰胺类抗生素的β-内酰胺环水解,使其丧失抗菌活性。主要特点为能水解青霉素类、头孢菌素类及单环类抗生素,而对头霉素类和碳青霉烯类无明显作用。因其耐药范围扩大、耐药性由质粒转移、发生率快速增长及新基因型的不断发现,已成为严重的公共卫生问题而引起高度重视。ESBLs已成为世界流行,于1997年-1998年在欧洲、美洲和西太平洋区进行调查表明:具有表型的产ESBLs肺炎克雷伯菌,在拉丁美洲为45.4%,西太平洋地区24.6%,加拿大仅为4.9%[24]。在意大利一项调查中,产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌的产酶率分别为37.1%和10.8%[25]。我国流行情况也较为严重,并有逐年增加的趋势。陈民钧等报道在中国重症监护病房革兰阴性菌耐药性连续7年监测研究中1994年临床分离的产ESBLs大肠埃希菌占10%,肺炎克雷伯菌占12%,2000年上升至25%和30%,2001年上升至35.3%和32.7%[26]。东方医院临床细菌性感染患者的标本中分离出的1356株病原菌中耐药菌的比例呈逐年增长,以大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼复合醋酸钙不动杆菌为主。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超光谱β-内酰胺酶（ESBLs）的菌株正逐渐增长,其中产ESBLs大肠埃希菌占47%（306）,肺炎克伯雷菌占25%（119）[7]。这些耐药菌株的出现和传播,给临床治疗和医院感染控制带来了新的难题。目的:通过双黄连粉针剂在体外对产ESBLs大肠埃希氏菌抑菌作用的研究,验证中药制剂对耐药菌的抑制作用,并探讨中西药联合应用对耐药菌的作用效果,为中药在体内的抑菌作用、机理及临床研究打下基础。方法:采用全自动微生物鉴定和药敏分析系统（VITEK-32）对细菌耐药性进行鉴定和表型筛选;参照临床和实验室标准研究所（CLSI/NCCLS）推荐的纸片扩散法对初步筛选的可疑菌株进行确认;参照临床和实验室标准研究所（CLSI/NCCLS）推荐的肉汤稀释法,研究双黄连粉针剂、双黄连粉针剂联合舒普深对产ESBLs大肠埃希菌的体外抑制作用。结果:双黄连对产ESBLs的大肠埃希氏菌的药物最低抑菌浓度（MIC）为70mg/ml;舒普深对产ESBLs的大肠埃希氏菌的MIC为31.25ug/ml;双黄连和舒普深联合作用于产ESBLs的大肠埃希氏菌,双黄连浓度60mg/ml作用6小时后,再用舒普深浓度15.625ug/ml即可抑制产ESBLs大肠埃希氏菌的生长,与单用双黄连比较,双黄连浓度降低了14.3%,与单用舒普深比较,舒普深浓度降低了50%;结论:双黄连对产ESBLs大肠埃希氏菌有一定的抑制作用,双黄连与舒普深联合应用（间隔6小时）在体外能够增强舒普深对产ESBLs大肠埃希氏菌的抑菌作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一部分：文献综述
• 综述一：清热解毒中药在细菌性肺部感染性疾病中的临床研究综述
• 综述二：双黄连粉针剂抗菌作用基础研究进展
• 综述三：超广谱β-内酰胺酶研究现状
• 第二部分：试验研究
• 前言
• 材料和方法
• 1 材料与仪器
• 2 产ESBLs 大肠埃希氏菌的分离与鉴定
• 2.1 标本来源
• 2.2 细菌检验
• 3 抑菌实验
• 4 技术路线
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 附图
• 附表
• 致谢
• 个人简历