本文主要研究内容
作者郝宝成,宋向东,高艳,王学红,刘宇,李元曦,梁妍,陈柯源,胡毓瑶,邢小勇,胡永浩,梁剑平（2019）在《产苦马豆素疯草内生真菌Alternaria SectionUndifilum oxytropis的诱变筛选》一文中研究指出：【背景】疯草是黄芪属和棘豆属有毒植物的统称,疯草内生真菌Alternaria Section Undifilum oxytropis是从疯草中分离获得的一种具有产生苦马豆素(swainsonine,SW)能力的真菌。因其产物SW一方面体现出良好的抑制肿瘤细胞生长、浸润和转移作用及潜在的抗艾滋病病毒等多种药用活性,另一方面牛羊因大量误食疯草能导致中毒,对草原畜牧业健康发展造成了严重的危害,受到研究人员的广泛关注。但由于疯草内生真菌Alternaria Section Undifilum oxytropis产苦马豆素生物合成机制尚不清楚,严重制约了后续通过生物发酵大量获得SW用以抗肿瘤机制研究与临床应用,以及通过基因工程手段对疯草进行脱毒育种,使疯草成为牛羊可食用、无毒的天然牧草。【目的】利用有效的研究手段,阐明Alternaria Section Undifilum oxytropis产苦马豆素生物合成机制。【方法】以Alternaria Section Undifilum oxytropis为出发菌株,分别采用紫外辐照诱变、亚硝基胍化学诱变、紫外辐照与亚硝基胍复合诱变的3种诱变方式,在不同诱变时间、诱变剂量等条件下对其进行了诱变筛选研究。通过测定不同诱变方式和作用条件下对菌株的致死率,经发酵培养、连续5代传代培养、并采用α-甘露糖苷酶活性分析法检测诱变菌株产苦马豆素含量变化,优化确定了不同诱变方式下最佳诱变条件,并将优势突变菌株接种马铃薯葡萄糖琼脂培养基(potato dextrose agar,PDA)和改良察式液体培养基,连续培养32 d,测定并绘制了突变菌株D4和UD1的生长周期曲线。【结果】经上述3种诱变方式处理后,分别获得1株产苦马豆素含量变化较大、能稳定连续传代培养的突变菌株U4、D4、UD1。其优化的诱变条件,紫外辐照为辐照处理160 s,亚硝基胍化学诱变为亚硝基胍诱变剂量6μL、诱变处理时间5 min,紫外辐照与亚硝基胍复合诱变为紫外辐照20 s,亚硝基胍诱变剂量2μL,诱变处理时间5 min。突变菌株U4、D4、UD1较原始菌株,菌落形态偏小、中间凸起,菌落颜色呈微粉色或白色,且其产苦马豆素含量均有显著变化,其中U4突变菌株产苦马豆素量平均增加16.02%(P<0.01)、D4突变菌株产苦马豆素量平均降低23.58%(P<0.01),UD1突变菌株SW产量平均增加21.87%(P<0.01),但D4、UD1突变菌株生长周期与出发菌株一致,均为24 d。【结论】通过紫外辐照诱变、亚硝基胍化学诱变、紫外辐照与亚硝基胍复合诱变方法,成功筛选出产苦马豆素含量变化较原始菌株差异较大的3株突变菌株U4、D4、UD1,这为后续利用高通量测序等分子生物学手段,在分子水平上阐释疯草内生真菌Alternaria Section Undifilum oxytropis关键基因、关键酶在其生物合成苦马豆素机制关系方面奠定研究基础。
Abstract
【bei jing 】feng cao shi huang qi shu he ji dou shu you du zhi wu de tong chen ,feng cao nei sheng zhen jun Alternaria Section Undifilum oxytropisshi cong feng cao zhong fen li huo de de yi chong ju you chan sheng ku ma dou su (swainsonine,SW)neng li de zhen jun 。yin ji chan wu SWyi fang mian ti xian chu liang hao de yi zhi zhong liu xi bao sheng chang 、jin run he zhuai yi zuo yong ji qian zai de kang ai zi bing bing du deng duo chong yao yong huo xing ,ling yi fang mian niu yang yin da liang wu shi feng cao neng dao zhi zhong du ,dui cao yuan chu mu ye jian kang fa zhan zao cheng le yan chong de wei hai ,shou dao yan jiu ren yuan de an fan guan zhu 。dan you yu feng cao nei sheng zhen jun Alternaria Section Undifilum oxytropischan ku ma dou su sheng wu ge cheng ji zhi shang bu qing chu ,yan chong zhi yao le hou xu tong guo sheng wu fa jiao da liang huo de SWyong yi kang zhong liu ji zhi yan jiu yu lin chuang ying yong ,yi ji tong guo ji yin gong cheng shou duan dui feng cao jin hang tuo du yo chong ,shi feng cao cheng wei niu yang ke shi yong 、mo du de tian ran mu cao 。【mu de 】li yong you xiao de yan jiu shou duan ,chan ming Alternaria Section Undifilum oxytropischan ku ma dou su sheng wu ge cheng ji zhi 。【fang fa 】yi Alternaria Section Undifilum oxytropiswei chu fa jun zhu ,fen bie cai yong zi wai fu zhao you bian 、ya xiao ji gua hua xue you bian 、zi wai fu zhao yu ya xiao ji gua fu ge you bian de 3chong you bian fang shi ,zai bu tong you bian shi jian 、you bian ji liang deng tiao jian xia dui ji jin hang le you bian shai shua yan jiu 。tong guo ce ding bu tong you bian fang shi he zuo yong tiao jian xia dui jun zhu de zhi si lv ,jing fa jiao pei yang 、lian xu 5dai chuan dai pei yang 、bing cai yong α-gan lou tang gan mei huo xing fen xi fa jian ce you bian jun zhu chan ku ma dou su han liang bian hua ,you hua que ding le bu tong you bian fang shi xia zui jia you bian tiao jian ,bing jiang you shi tu bian jun zhu jie chong ma ling shu pu tao tang qiong zhi pei yang ji (potato dextrose agar,PDA)he gai liang cha shi ye ti pei yang ji ,lian xu pei yang 32 d,ce ding bing hui zhi le tu bian jun zhu D4he UD1de sheng chang zhou ji qu xian 。【jie guo 】jing shang shu 3chong you bian fang shi chu li hou ,fen bie huo de 1zhu chan ku ma dou su han liang bian hua jiao da 、neng wen ding lian xu chuan dai pei yang de tu bian jun zhu U4、D4、UD1。ji you hua de you bian tiao jian ,zi wai fu zhao wei fu zhao chu li 160 s,ya xiao ji gua hua xue you bian wei ya xiao ji gua you bian ji liang 6μL、you bian chu li shi jian 5 min,zi wai fu zhao yu ya xiao ji gua fu ge you bian wei zi wai fu zhao 20 s,ya xiao ji gua you bian ji liang 2μL,you bian chu li shi jian 5 min。tu bian jun zhu U4、D4、UD1jiao yuan shi jun zhu ,jun la xing tai pian xiao 、zhong jian tu qi ,jun la yan se cheng wei fen se huo bai se ,ju ji chan ku ma dou su han liang jun you xian zhe bian hua ,ji zhong U4tu bian jun zhu chan ku ma dou su liang ping jun zeng jia 16.02%(P<0.01)、D4tu bian jun zhu chan ku ma dou su liang ping jun jiang di 23.58%(P<0.01),UD1tu bian jun zhu SWchan liang ping jun zeng jia 21.87%(P<0.01),dan D4、UD1tu bian jun zhu sheng chang zhou ji yu chu fa jun zhu yi zhi ,jun wei 24 d。【jie lun 】tong guo zi wai fu zhao you bian 、ya xiao ji gua hua xue you bian 、zi wai fu zhao yu ya xiao ji gua fu ge you bian fang fa ,cheng gong shai shua chu chan ku ma dou su han liang bian hua jiao yuan shi jun zhu cha yi jiao da de 3zhu tu bian jun zhu U4、D4、UD1,zhe wei hou xu li yong gao tong liang ce xu deng fen zi sheng wu xue shou duan ,zai fen zi shui ping shang chan shi feng cao nei sheng zhen jun Alternaria Section Undifilum oxytropisguan jian ji yin 、guan jian mei zai ji sheng wu ge cheng ku ma dou su ji zhi guan ji fang mian dian ding yan jiu ji chu 。
论文参考文献
论文详细介绍
论文作者分别是来自中国农业科学的郝宝成,宋向东,高艳,王学红,刘宇,李元曦,梁妍,陈柯源,胡毓瑶,邢小勇,胡永浩,梁剑平，发表于刊物中国农业科学2019年15期论文，是一篇关于疯草内生真菌论文,苦马豆素论文,诱变筛选论文,生物合成机制论文,中国农业科学2019年15期论文的文章。本文可供学术参考使用，各位学者可以免费参考阅读下载，文章观点不代表本站观点，资料来自中国农业科学2019年15期论文网站，若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权，请联系我们删除。
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