郑氏七厘散对大鼠急性软组织损伤组织中bFGF、PGE2影响的实验研究

论文摘要

目的:通过建立SD大鼠急性软组织损伤模型,采用我院已故著名武医专家郑怀贤教授的临床经验方郑氏七厘散作为治疗药物内服治疗,观察郑氏七厘散对大鼠急性软组织损伤的治疗作用。探讨该中药方剂对急性软组织损伤组织修复及镇痛的影响,并为该药临床治疗急性软组织损伤提供理论依据。方法:选取二月龄雄性SD大鼠72只,实验室适应性喂养7天后体重222.4±31.9g,采用打击法造模,造模后随机分为空白对照组(空白组,n=24)、药物对照组(《良方集腋》七厘散组,n=24)、实验组(郑氏七厘散组,n=24)。分三组后再随机分为4个时相点组(1天组、3天组、7天组、10天组,n=6)。按照不同组别,分别给予《良方集腋》七厘散组、郑氏七厘散组中药灌服,每12小时1次,空白对照组给予蒸馏水灌服。在每个时相点观察用药后的软组织损伤指数变化、检测损伤组织中前列腺素2( prostaglandin E2,PGE2)含量、光镜下观察组织形态学的改变并用免疫组织化学法观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)在损伤组织中的蛋白表达,测定bFGF蛋白表达的积分光密度值(Integrated Optical Density,IOD)。将结果用软件进行数据处理分析。结果:(1)软组织损伤指数:造模后动物单侧后肢即刻出现跛行。三组动物软组织均出现损伤性改变:造模区青紫,瘀血,肿胀。造模后第1天、第3天三组大鼠的损伤指数评分没有显著差异(P>0.05);第7天郑氏七厘散组与空白组比较有显著性差异(P<0.05);第10天郑氏七厘散组及《良方集腋》七厘散组与空白组比较均有高度显著性差异(P<0.01),郑氏七厘散组与《良方集腋》七厘散组无显著差异(P>0.05)。(2)组织切片病理形态学观察:造模后第1、3、7天,三组大鼠的病理形态学检查评分无差异;第10天,郑氏七厘散组及《良方集腋》七厘散组与空白组比较有显著性差异(P<0.05),郑氏七厘散组与《良方集腋》七厘散组比较无差异。(3)PGE2含量检测:三组大鼠受伤局部PGE2含量在受伤后第1天、第3天两个时相点持续升高,第7天与第10天平缓下降,但第10天值仍高于第1天。郑氏七厘散组与《良方集腋》七厘散组能使受伤局部PGE2含量降低,且伤后24小时内就已出现效应。造模后第1、3、7、10天郑氏七厘散组与《良方集腋》七厘散组组织匀浆中PGE2含量与空白组的PGE2含量比较均有高度显著性差异(P<0.01),但郑氏七厘散组PGE2含量又低于《良方集腋》七厘散组,组间无显著性差异(P>0.05)。(4)bFGF免疫组化后检测积分光密度值:造模后第1天,郑氏七厘散组和《良方集腋》七厘散组bFGF的平均光密度值均高于空白对照组(P<0.01)。造模后第3天,郑氏七厘散组和《良方集腋》七厘散组的平均光密度值逐渐降低,但仍高于同期的空白对照组(P<0.01)。造模后第7天,郑氏七厘散组和《良方集腋》七厘散组的平均光密度值继续降低,同期空白对照组平均光密度值却明显上升(P>0.05)。造模后第10天,空白对照组的平均光密度值反而明显高于郑氏七厘散组和《良方集腋》七厘散组(P<0.01)。四个时相点郑氏七厘散组bFGF的平均光密度值均高于《良方集腋》七厘散组,但无显著性差异(P>0.05)。结论:郑氏七厘散对大鼠急性软组织损伤有明确的治疗作用。可通过降低损伤局部组织中PGE2含量发挥镇痛作用,并加快损伤组织中的碱性成纤维细胞生长因子的表达,缩短软组织损伤的修复过程。郑氏七厘散与《良方集腋》七厘散治疗急性软组织损伤的疗效相当,在临床上值得推广和应用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 前言
• 2 综述
• 2.1 中医对急性软组织损伤的认识及治疗
• 2.1.1 急性软组织损伤的中医认识及中医诊治的理论基础
• 2.1.2 中医对急性软组织损伤的治疗
• 2.2 现代医学对急性软组织损伤的认识及治疗
• 2.2.1 现代医学对急性软组织损伤的病理生理变化认识
• 2.2.2 现代医学对急性软组织损伤的治疗
• 2.3 前列腺素与急性软组织损伤
• 2.3.1 前列腺素概述
• 2.3.2 PGE2 在急性炎症中的作用
• 2.3.3 PGE2 在损伤组织中的表达
• 2.4 碱性成纤维细胞生长因子与急性软组织损伤
• 2.4.1 bFGF 概述
• 2.4.2 bFGF 对组织的修复作用
• 2.4.3 bFGF 参与组织修复的细胞培养与动物实验研究
• 2.4.4 bFGF 参与组织修复的临床应用
• 2.4.5 bFGF 在损伤组织中的表达变化与损伤时间的关系
• 3 材料与方法
• 3.1 主要材料
• 3.1.1 实验动物
• 3.1.2 主要实验仪器设备
• 3.1.3 实验用药物及主要试剂
• 3.2 实验方法
• 3.2.1 实验药物制备
• 3.2.2 实验动物饲养、造模、分组
• 3.2.3 实验给药途径、剂量、方法
• 3.2.4 指标观察与数据记录
• 3.2.5 统计学分析
• 4 实验结果
• 4.1 造模、给药及取材情况
• 4.2 大鼠体重情况
• 4.3 大鼠软组织损伤指数结果
• 4.4 组织形态学检查结果
• 4.5 酶联免疫法检测PGE2 含量情况
• 4.6 免疫组织化学染色检测bFGF 表达情况
• 5 分析与讨论
• 5.1 本实验采取的造模方式
• 5.2 关于本实验bFGF 的积分光密度值在不同损伤时间表达量变化的原因分析
• 5.3 本实验结果中PGE2 在不同损伤时间表达量变化的原因分析
• 5.4 郑氏七厘散治疗机理讨论
• 5.4.1 郑氏七厘散组方分析
• 5.4.2 郑氏七厘散方药现代药理学分析
• 5.4.3 郑氏七厘散可能治疗机理
• 5.5 本次实验尚待完善之处
• 5.6 结论
• 6 参考文献
• 致谢
• 附件