黑龙江省稻瘟病菌对稻瘟灵和三环唑的敏感性研究

论文摘要

本研究用菌丝生长速率法测定了黑龙江省不同稻作区采集的65个稻瘟病菌株对稻瘟灵和三环唑的敏感性。在所有测试的菌株中,稻瘟灵的抑制中浓度为1.1847～6.8976μg·mL-1,最不敏感菌株和最敏感菌株的EC50值相差5.82倍;确定了黑龙江省稻瘟病菌对稻瘟灵的敏感基线值(EC50值)为3.7472μg·mL-1,供试菌株对稻瘟灵均为敏感菌株,但是不同菌株对稻瘟灵的敏感性是有差异的。对供试菌株的地理区域划分结果表明,牡丹江市局部地区、哈尔滨市的通河县和鹤岗市局部地区的稻瘟病菌菌株对稻瘟灵较为敏感;对稻瘟灵较为不敏感的菌株多分布在黑龙江省的中偏南部地区,大约是北纬45.3～45.7度沿线,最不敏感的菌株出现在鸡东县。在所有测试的65个菌株中,三环唑的抑制中浓度为19.8153～97.8138μg·mL-1,平均EC50为33.2527μg·mL-1,最不敏感菌株和最敏感菌株的EC50值相差4.94倍,确定出稻瘟病菌对三环唑的敏感基线值为(EC50值)32.2439μg·mL-1。检测出1株低抗菌株,出现在鹤岗市东方红乡;其它菌株均为敏感菌株。对三环唑较敏感的供试菌株多分布在黑龙江省的东部地区,集中在绥滨、富锦、宝清和虎林地区,通河和牡丹江的林口县也有较敏感菌株的分布,鹤岗局部地区的菌株对三环唑最为不敏感。利用菌丝生长速率法,测定了黑龙江省不同地区的10个稻瘟病菌生理小种对稻瘟灵和三环唑的敏感性。所有测试的生理小种对稻瘟灵均为敏感菌株。同时,在实验室条件下比较了供试菌株在药剂(8μg·mL-1)选择压力下连续传代10次的EC50值,发现供试菌株在药剂胁迫下培养数代后其EC50值有增高趋势,这表明供试菌株在药剂选择压力下敏感性在逐渐降低。研究结果表明,稻瘟病菌容易对稻瘟灵产生抗性突变,突变株抗药性有所增加,供试IPTr突变株均升为低抗菌株或中抗菌株。获得的IPTr突变株抗药性程度比亲本菌株高,菌丝生长速率与亲本菌株差异较大,大多数诱变抗性菌株和亲本菌株的产孢量差异不显著,在致病力的测定中,只有菌株Y-LE和Y-SJ与亲本菌株的病情指数达到显著性差异,具有抗药性风险。供试的10个稻瘟病菌生理小种对三环唑均为敏感菌株。稻瘟病菌通过离体条件下的药剂连续驯化表明,随着转代次数的增加,病原菌对三环唑的敏感性呈下降趋势,不同生理小种表现不一致。同时,通过药剂驯化和紫外诱变的方法都获得了稻瘟病菌的突变体,但突变率较低,获得的突变体对三环唑的抗性明显高于亲本,但仅有1/3供试突变体升为低抗菌株。与亲本菌株相比,获得的多数突变体的菌丝生长速率较慢,产孢能力稍有下降,但致病力没有显著差异。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 引言
• 第一章 文献综述
• 1.1 水稻稻瘟病的研究概况
• 1.1.1 稻瘟病的历史记载与病原菌命名
• 1.1.2 稻瘟病的分布与危害
• 1.1.3 稻瘟病的症状
• 1.1.4 稻瘟病的发病规律
• 1.1.5 稻瘟病的病原物
• 1.2 防治稻瘟病药剂的作用机制
• 1.2.1 重金属化合物的作用机制
• 1.2.2 蛋白质生物合成抑制剂的作用机制
• 1.2.3 磷脂质生物合成抑制剂的作用机制
• 1.2.4 寄主抗性增强剂的作用机制
• 1.2.5 黑色素合成抑制剂的作用机制
• 1.2.6 甲氧丙烯酸脂类的作用机制
• 1.3 稻瘟病菌抗药性的研究进展
• 1.3.1 对抗生素的抗性
• 1.3.2 对磷脂质生物合成抑制剂的抗性
• 1.3.3 对甲氧丙烯酸脂类的抗性
• 1.3.4 对黑色素合成抑制剂的抗性
• 1.4 抗药性风险的研究方法
• 1.4.1 抗药性风险评估的内容
• 1.4.2 抗药性风险评估方法及应用
• 1.4.3 抗药性的治理策略
• 第二章 黑龙江省稻瘟病菌对稻瘟灵和三环唑的敏感性分析
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 实验材料
• 2.1.2 实验方法
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 稻瘟病菌对供试药剂的敏感性测定
• 2.2.2 稻瘟病菌对供试药剂的敏感基线的建立
• 2.2.3 供试菌株的敏感性表现
• 2.2.4 黑龙江省各稻作区稻瘟病菌对供试药剂的敏感程度
• 2.3 小结
• 第三章 稻瘟病菌对稻瘟灵抗药性风险研究
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 供试药剂
• 3.1.2 供试菌株
• 3.1.3 供试培养基及水稻品种
• 3.1.4 稻瘟病生理小种对稻瘟灵的敏感性测定及抗药性程度确定
• 3.1.5 药剂选择压力下菌株培养后代的敏感性测定
• 3.1.6 稻瘟病生理小种对稻瘟灵抗药性风险分析
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 不同生理小种对稻瘟灵敏感性测定结果
• 3.2.2 生理小种对稻瘟灵抗性水平的划分结果
• 3.2.3 药剂选择压力下稻瘟病菌菌株培养后代对药剂的敏感性变化
• 3.2.4 稻瘟灵对稻瘟病菌生理小种诱变及抗药性突变频率测定
• 3.2.5 稻瘟灵诱导抗性菌株的抗性水平测定
• 3.2.6 稻瘟灵诱导抗性菌株遗传稳定性测定
• 3.2.7 稻瘟灵诱导抗性菌株的适合度测定
• 3.3 小结
• 第四章 稻瘟病菌对三环唑抗药性风险研究
• 4.1 材料与方法
• 4.1.1 供试药剂
• 4.1.2 供试菌株
• 4.1.3 供试培养基及水稻品种
• 4.1.4 稻瘟病菌生理小种对三环唑的敏感性测定及抗性程度确定
• 4.1.5 药剂选择压力下菌株培养后代的敏感性测定
• 4.1.6 稻瘟病菌生理小种对三环唑抗药性风险分析
• 4.2 结果与分析
• 4.2.1 不同生理小种对三环唑的敏感性测定结果
• 4.2.2 生理小种对三环唑抗性水平划分结果
• 4.2.3 药剂选择压力下稻瘟病菌后代抑制率的变化
• 4.2.4 三环唑对稻瘟病菌生理小种的诱变及抗药性突变频率测定
• 4.2.5 三环唑诱导抗性菌株的抗性水平测定
• 4.2.6 三环唑诱导抗性菌株的遗传稳定性测定
• 4.2.7 三环唑诱导抗性菌株的适合度测定
• 4.3 小结
• 第五章 结论与讨论
• 5.1 结论
• 5.2 讨论
• 5.2.1 关于敏感基线的建立
• 5.2.2 黑龙江省稻瘟病菌对稻瘟灵和三环唑的敏感性
• 5.2.3 稻瘟病菌对稻瘟灵和三环唑的抗药性评价
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 作者简介