论文摘要
【目的】观察光损伤大鼠视网膜肿瘤坏死因子（TNF）-α表达变化的规律，及预先使用米诺环素（Minocycline，MC）对其分泌表达的影响，探讨视网膜光损伤的损伤机制和防治措施。【方法】54只SD大鼠，随机分为光照对照组、光照实验组，每一组再分为光照后6小时、3天、7天、14天组，另设正常对照组，每组各6只大鼠（12只眼）。所有大鼠暗适应24小时。正常对照组暗适应后直接取材。光照前90分钟，光照实验组大鼠MC灌胃（45mg／kg），光照对照组大鼠等量PBS液灌胃。光照强度1737.9±393.0lux的绿色荧光灯连续照射36小时。分别于预定时间点取眼球，左眼石蜡包埋、HE染色、TNF-α免疫组化染色，计算机图像分析软件（Image-Pro Plus，IPP）测量视网膜外核层（outer nuclear layer，ONL）厚度。右眼球摘除后即刻完整取出视网膜，匀浆后取上清液，ELISA法测定TNF-α的吸光度（O．D）值并计算出TNF-α浓度。数据用SPSS15.0 for Windows进行统计分析。【结果】1，正常对照大鼠视网膜形态正常，TNF-α未见阳性染色，ELISA定量仅含微量。2，光照对照组视网膜6小时即出现病理改变，3天和7天进行性加重，14天略有减轻。视网膜TNF-α阳性表达6小时开始增加，3天显著增加，7天减少，14天进一步减少，ELISA定量结果和免疫组化结果相平行。各时间点ONL厚度、TNF-α表达量和正常对照组相比，P值均＜0.05。3，光照实验组各时间点视网膜病理改变均较光照对照组轻，各对应时间点ONL厚度两两比较P值均＜0.05，和正常对照组相比（6小时组除外），P值均＜0.05，而6小时组P＞0.05。TNF-α表达量均较光照对照组同一时间点为少，两两比较P值均P＜0．05，和正常对照组比较（14天组除外）P值均＜0.05，14天组P＞0.05。【结论】本实验首次研究了光损伤大鼠视网膜TNF-α定位和定量的表达变化，及预先使用米诺环素对TNF-α表达变化和视网膜病理损伤的影响，得出如下结论：1．光损伤大鼠视网膜TNF-α表达增加且呈动态变化，与视网膜损伤程度密切相关，说明光损伤时过度表达的TNF-α参与并加重了视网膜光损伤。2．MC能减少光损伤大鼠视网膜感光细胞的丢失，对视网膜有保护作用，该保护作用主要是通过抑制TNF-α分泌细胞的活性、减少TNF-α的过度分泌实现的。3．分泌TNF-α的小胶质细胞参与了视网膜光损伤的病理生理过程。