论文摘要
P2是我室利用噬菌体展示肽库技术筛选出的aFGF拮抗剂,它可以模拟aFGF与受体FGFR1的疏水表面相结合。为了研究P2对FGF的胞内信号传导途径的影响,我们利用Fmoc固相法合成了六肽P2,并设计了三个不同的条件刺激NIH3T3细胞,分别为:未加任何刺激的原始细胞、aFGF+肝素刺激的细胞、aFGF+肝素+P2抑制剂刺激的细胞。利用双向凝胶电泳（2D-PAGE）技术分离收获的蛋白,ImageMaster 2D Platium软件进行图像处理,质谱分析。具体结果如下:（1）在后两种状态细胞的全蛋白图谱中找出差异两倍以上且重复三次的点五个,利用ESI-MS/MS进行鉴定。有四个点表达量下调,一个表达量上调。下调的点分别为1号胞质肌动蛋白1 （Actin, cytoplasmic 1）; 2号α?烯醇酶（Alpha-enolase）;3号真核翻译起始因子6（Eukaryotic translation initiation factor 6）;5号α?烯醇酶（Alpha-enolase）;上调的点为4号磷酸丙酮异构酶（Triosephosphate isomerase）。（2）采用Qiagen公司的磷酸化蛋白亲合纯化试剂盒富集提取全磷酸化蛋白。由于影响样品聚焦的因素较多,目前条件尚在摸索当中。