胸膜肺炎放线杆菌APXIIA基因的克隆及其免疫相关区的筛选

胸膜肺炎放线杆菌APXIIA基因的克隆及其免疫相关区的筛选

论文摘要

本研究根据GeneBank收录的胸膜肺炎放线杆菌的核苷酸序列设计特异性引物从提取的胸膜肺炎放线杆菌基因组上PCR扩增获得2868bp毒力因子溶血素基因APXIIA,同源性分析表明其与GeneBank中收录核苷酸序列具有较高的同源性。人工设计寡核苷酸序列和引物,PCR扩增获得核糖体展示上游引物,与APXIIA基因的酶切片段和设计合成的核糖体展示下游引物连接获得核糖体展示改造基因,通过核糖体展示技术,将APXIIA基因的部分酶切片段在体外转录、翻译,与包被的APP抗血清进行了免疫筛选。对筛选获得的195bp免疫相关区进行核苷酸序列测定,并通过生物信息学软件对其推导的蛋白质进行了二级结构、亲水性以及抗原性分析,结果表明推导的蛋白质二级结构主要以β-折叠和无规则卷曲为主,可能为一亲水肽,且具有良好的免疫原性。至于可否取代APXIIA基因做为研制新型疫苗的候选基因尚待进一步的研究。

论文目录

  • 内容提要
  • 英文缩写词表
  • 前言
  • 第一篇 文献综述
  • 第一章 胸膜肺炎放线杆菌毒力因子的研究进展
  • 第二章 核糖体展示技术应用的研究进展
  • 第二篇 研究内容
  • 第一章 胸膜肺炎放线杆菌APXIIA 基因的克隆及序列分析
  • 1 材料和方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 第二章 胸膜肺炎放线杆菌APXIIA 基因免疫相关区的筛选
  • 1 材料与方法
  • 2 结果
  • 3 讨论
  • 4 小结
  • 结论
  • 参考文献
  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 附录
  • 致谢
  • 导师及作者简介
  • 1 导师简介
  • 2 作者简介
  • 相关论文文献

    • [1].猪胸膜肺炎放线杆菌ApxIIA基因的序列分析及其B细胞表位预测[J]. 生物技术通报 2009(07)

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    胸膜肺炎放线杆菌APXIIA基因的克隆及其免疫相关区的筛选
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