内源性CSE/H2S介导缺血后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的拮抗作用

论文摘要

研究背景:心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI）是心脏移植、冠状动脉内溶栓术、冠状动脉内介入治疗及冠状动脉搭桥术的主要并发征,其发病机制尚不完全清楚。MIRI愈来愈引起人们的广泛重视,寻求可行和有效的治疗措施以减轻MIRI有着重要的临床应用价值。缺血后处理（ischemic postconditioning, IPO）是近年来发现的一种新的心肌保护现象,即在心肌缺血再灌注开始后立即给予多次短暂再灌、缺血处理可以减轻长时间再灌后对心肌造成的损伤。硫化氢（hydrogen sulfide, H2S）为一种新发现的、具有重要心血管效应的内源性气体信号分子,心血管系统中的H2S可以在半胱氨酸代谢过程中由胱硫醚-γ-裂解酶（cystathionine-γ-lyase, CSE）催化内源性合成。外源性给予H2S能有效保护心肌的缺血性损伤;而内源性CSE/H2S通路是否介导IPO对MIRI的拮抗作用尚不清楚。目的:探讨内源性CSE/H2S通路是否介导IPO对大鼠MIRI的拮抗作用。方法:利用Langendorff逆行灌流装置对大鼠心脏进行离体灌流,通过K-H液停灌和复灌,建立离体心脏全心缺血再灌注模型。40只SD大鼠随机分为5组。（1）缺血再灌注组（IR组）:缺血30min,再灌注90min;（2）缺血后处理组（IPO组）:缺血末6个循环的再灌注10s/停灌10s,再灌注88min;（3）CSE抑制剂PAG+缺血后处理组（PAG组）:在动物实施手术前10min腹腔注射20mg/kg CSE抑制剂PAG,其余操作同IPO组;（4）CSE抑制剂PAG+缺血后处理+40μmol/L NaHS （PPN组）:动物处理及灌流操作同PAG组,但复灌后持续再灌注含40μmol/LNaHS的K-H灌注液90min;（5）CSE抑制剂PAG+40μmol/L NaHS（PIN组）:手术前10min腹腔注射20mg/kg PAG后操作同IR组,但复灌后持续再灌注含40μmol/L NaHS的K-H灌注液90min;记录冠脉流出量、心率、左室发展压;检测冠脉流出液中乳酸脱氢酶和肌酸激酶活性、心肌梗死面积和心肌组织CSE活性及硫化氢的含量。结果:缺血前各组间指标差异无显著性。随着再灌注时间的延长各组心功能显著下降,表现出缺血再灌注损伤对心功能的影响。各组大鼠心脏于复灌各时间点CF比较无显著差异（P>0.05）。IPO组、PPN组和PIN组在复灌30min后HR恢复较好,显著高与IR和PAG组（P<0.05）。再灌注即刻给予缺血后处理（IPO组）能明显改善缺血心肌的LVDP,有效减缓缺血再灌注引起的左室舒缩功能下降,大鼠心脏于各时间点LVDP升高,60min时最为显著,较IR组升高173.45%,冠脉流出液LDH和CK活性降低,梗死面积缩小60.87%,心肌CSE活性及H2S含量分别升高126.96%和139.43%（all P<0.05）。经腹腔注射PAG（PAG组）明显抑制了IPO对受损心功能的改善,灌注末LVDP下降79.65%,梗死面积扩大170.71%,冠脉流出液LDH和CK活性升高76.78%、77.85%,心肌CSE活性及H2S含量分别降低67.72%、68.89%（all P<0.05）。腹腔注射PAG后给予NaHS（PPN组、PIN组）,90min结果表现出明显改善缺血再灌注心肌LVDP,较IR组分别升高140.12%、93.93%,梗死面积缩小57.09%和62.68%,降低冠脉流出液LDH活性39.52%、36.93%和CK活性34.52%、27.98%（all P<0.05）,其效果与IPO相当。IPO、PPN和PIN组之间,除15min时PIN组LDH活性较IPO组和PPN组增高20.02%、15.69%（P<0.05）外,无显著差异。结论:1. IPO对MIRI有拮抗作用;2. IPO可致心肌CSE/H2S水平上升;3. CSE抑制剂PAG能降低IPO对MIRI的拮抗作用;4.内源性CSE/H2S可介导IPO对MIRI的拮抗作用。

论文目录

• 一、主要英文缩略语
• 二、中文摘要
• 三、英文摘要
• 四、正文
• 1 前言
• 2 材料与方法
• 3 实验结果
• 4 讨论
• 5 结论
• 五、参考文献
• 六、文献综述
• 七、硕士期间发表论文
• 八、课题支助情况
• 九、致谢