论文题目: 被子植物体外双受精：配子融合与受精卵早期发育事态
论文类型: 博士论文
论文专业: 发育生物学
作者: 彭雄波
导师: 孙蒙祥,杨弘远
关键词: 体外受精,卵细胞,精细胞,核迁移,烟草,玉米
文献来源: 武汉大学
发表年度: 2005
论文摘要: 以玉米和烟草为材料,分离出其雌、雄配子,利用体外受精系统对受精早期发育事态进行了研究。探讨了从精细胞和卵细胞质膜融合到它们的核融合完成这一发育阶段的某些主要事件。其目的是了解发生在层层细胞组织包围中的受精后早期发育事态的细胞学动态及其机制。主要结果概述如下: 1.建立了新的体外受精系统。在过去的二十年中,在被子植物中发展了许多方法来诱导配子间的融合,包括电融合,钙离子介导的融合,高钙高pH值介导的融合和聚乙二醇介导的融合。这些方法为研究被子植物的受精机制提供了新的途径。但是建立新的系统以提高效率、接近自然状态仍然是体外受精研究的重要内容。我们在玉米中创建了一种新的体外受精系统。在显微镜下,在含有小牛血清白蛋白的溶液中诱导了玉米的精子和卵细胞融合,融合产物随后再生了细胞壁,进行了细胞核分裂,表明我们发展的新融合系统基本不影响配子的活力。我们调查了溶液中小牛血清白蛋白的浓度,pH值和钙离子的浓度对融合频率的影响。小牛血清白蛋白的浓度和溶液的pH值对配子融合有很大的影响。钙离子对于融合并不是必需的,相反,浓度高达2mM的钙离子抑制了配子间的融合。在含0.1%小牛血清白蛋白(BSA),pH6.0的溶液中,玉米的精卵融合率可以高达96.7%。在我们这个融合系统中,来自一个花粉粒的两个精子都能与卵细胞受精。这个新的融合系统与聚乙二醇融合系统相比,具有操作上的简便性,为研究受精机制提供了另一种选择。另外,由于该融合系统能够在有钙离子和无钙离子的情况下诱导配子融合,所以该系统非常适用于研究被子植物受精过程中的钙离子动态和研究受精过程中卵细胞钙波的钙离子来源。
论文目录:
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英文摘要
第一章 前言
一.哺乳动物体外受精和受精早期事态研究
1.精卵质膜相互作用
2.卵子质膜去极化
3.钙振荡和钙波
4.皮质反应
5.极体的形成
6.雌、雄原核形成及融合或联合
二.被子植物双受精的研究概况
三.双受精的体外研究
1.配子分离
1.1.精子的分离
1.2.胚囊和卵细胞的分离
2.体外融合系统的建立
3.利用离体受精系统进行的细胞生物学研究
3.1.配子识别
3.2.多精入卵阻断
3.3.卵激活
3.4.核融合与雄核去凝缩
四.钙在受精中的作用
1.阻止多精受精
2.卵激活
3.受精过程中精子激活卵的机制
3.1.受体控制假说
3.2.精子因子假说
第二章 新的体外受精系统的建立
一.前言
二.材料和方法
三.实验结果
四.讨论
第三章 被子植物性细胞钙离子装载系统的建立
一.前言
二.材料和方法
三.实验结果
四.讨论
第四章 被子植物多精入卵阻断机制的研究
一.前言
二.材料和方法
三.实验结果
四.讨论
第五章 被子植物精核迁移的研究
一.前言
二.材料和方法
三.实验结果
四.讨论
第六章 雌雄配子融合亲和性的研究
一.前言
二.材料和方法
三.实验结果
四.讨论
参考文献
图版与图版说明
在读期间发表与投稿论文
致谢
发布时间: 2006-03-27
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