论文摘要
目的:用临床治疗类风湿性关节炎使用频率高的解表药(麻黄、桂枝)祛风湿药(川乌、草乌)活血药(当归、川芎)及其复方制成煎剂,对佐剂性关节炎的大鼠灌胃治疗,通过观察足爪肿胀、病理改变、炎性因子等指标的改变,探讨不同配伍的中药的作用效果、配伍规律、药物作用机制以及在复方中发挥主要作用的药物等。方法:1.健康雄性Wistar大鼠24只,随机分为模型组和对照组,每组12只,模型组每只左后足趾部皮内注射卡介苗浓度10mg/ml的完全弗氏佐剂0.1ml,对照组相同部位注射等量的生理盐水,制炎后每隔日测定双侧足爪肿胀程度,第22天,处死大鼠,取右侧踝关节制作切片,观察滑膜组织,以确定造模是否成功。2.雄性Wistar大鼠84只,随机分为对照组、模型组、地塞米松组、复方组、祛风湿组、活血组、解表组,每组12只。除对照组之外,其余各组均制作佐剂性关节炎大鼠模型。各组给予不同的药物合剂,药物用量根据动物给药剂量公式和大鼠体表面积计算所得,每组灌胃22天。模型制备开始后每隔天测量双侧足爪肿胀度,以观察治疗后的疗效;第22天,心脏采血,测量血清NO、MDA水平与SOD活性;每组随机选择3只取右侧踝关节做切片,以观察滑膜组织病理改变。其余9只用ELISA法检测足爪浸液中TNF-α、IL-1β、PGE2水平。剥离每只大鼠的胸腺和脾脏,分别称重,计算胸腺指数或脾脏指数。结果:1.模型组大鼠左侧足爪在注射佐剂次日即明显肿胀,第3天达高峰,以后逐渐减轻。第11天右侧足爪开始肿胀,第15天达高峰,关节活动功能障碍,此后肿胀逐渐减轻直至观察结束。模型组除个别大鼠外,均可见耳部、鼻尖、尾部炎性小结。右侧踝关节病理切片显示:滑膜细胞增生,炎症细胞浸润,血管翳形成。说明佐剂性关节炎造模成功。2.与模型组比较,复方组、地塞米松组、祛风湿组、解表合剂、活血合剂对左右双侧足爪肿胀度均有明显地抑制作用,其中复方组、地塞米松组、祛风湿组作用最强。组间比较显示:左侧足爪从治疗后第7天开始,右侧足爪从治疗后的第13天开始,复方组、地塞米松组、祛风湿组的治疗效果基本相同。与复方组比较,活血组对足爪肿胀抑制程度弱于复方组,解表组的抑制作用最弱,且与复方组有显著统计学差异。3.复方组、地塞米松组、祛风湿组足爪浸液TNF-α、IL-1β、PGE2水平明显低于模型组,解表组足爪PGE2水平低于模型组,活血组足爪浸液TNF-α, IL-1β、PGE2的水平与模型组无统计学差异。解表组、活血组足爪浸液TNF-α、IL-1βPGE2水平要明显高于复方组。4.复方组、地塞米松组、祛风湿组、活血组血清MDA、NO水平明显低于模型组,SOD活性高于模型组,而解表组与模型组无统计学差异。5.造模组脾脏指数与胸腺指数明显高于正常,而地塞米松组明显低于正常;各中药治疗组的脾脏指数与胸腺指数均有所升高,与模型组没有统计学差异。6.各组大鼠踝关节病理切片显示:复方组和祛风湿组少见炎性细胞浸润、渗出及血管翳形成,解表组和活血组有滑膜细胞增厚,轻中度炎症细胞浸润,偶见血管翳形成。结论:1.本次实验造模的AA大鼠在临床表现、病理、免疫与人RA有着相似的特点,是研究RA的较理想模型。2.复方合剂、祛风湿合剂、活血合剂、解表合剂均能抑制AA大鼠足爪的肿胀,改善踝关节病理变化,其中,复方合剂有明显的治疗效果,祛风湿合剂在治疗效果与复方合剂无差异,说明:祛风湿合剂在复方合剂中可能发挥主要的治疗作用。3.复方合剂和祛风湿合剂作用机制可能是通过抑制炎性因子TNF-α、IL-1βPGE2水平表达;同时降低血清自由基的浓度;抑制NO的释放;上调SOD水平发挥治疗作用的。活血合剂有降低血清自由基浓度、抑制NO的释放、上调SOD活性的作用,解表合剂只有降低足爪浸液的PGE2水平的能力,综上说明:临床上常用治疗RA的中药是通过多环节起到治疗效果,且作用环节与治疗作用存在着正相关。
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