论文摘要
目的 高同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)血症是近年确立的动脉粥样硬化(athemsclerosis, AS)的新的独立危险因素,但其致病机制还不十分清楚。由于冠心病严重威胁人类健康和生命,因此深入探讨Hcy致AS的机制具有重要的临床意义。氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, OxLDL)在血管内皮功能失调和AS中起着至关重要的作用。血凝素样氧化低密度脂蛋白受体-1(lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1, LOX-1)是OxLDL在血管内皮细胞的特异受体,它的可诱导表达介导了OxTDL的多种致AS作用。本研究应用Hcy与培养的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVECs)共同孵育,通过观察Hcy对HUVECs上LOX-1表达的影响来深入探讨Hcy致AS的可能分子机制。 方法 1、细胞培养:人脐静脉内皮细胞株(ECV304)常规传代培养于10%胎牛血清-1640培养基中,37℃,5%CO2,饱和湿度。 2、实验分组:将常规传代的HUVECs接种于25cm2培养瓶内,待均匀铺满瓶底后,加入无血清1640孵育24h,然后随机分为:(1)Hcy不同浓度组:对照组加无血清1640,实验组加Hcy,终浓度分别为0.01、0.05、0.1、0.5、1、5mmol/L(mM),孵育24h。(2)1mMHcy不同时间组:分别孵育0、6、12、24、48h,0h做为对照。 3、应用RT-PCR方法检测LOX-1mRNA表达:(1)细胞总RNA的提
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