林婧楠:鲤春病毒血症病毒糖蛋白酵母表面展示系统的建立论文

林婧楠:鲤春病毒血症病毒糖蛋白酵母表面展示系统的建立论文

本文主要研究内容

作者林婧楠,赵景壮,刘淼,任广明,卢彤岩,徐黎明(2019)在《鲤春病毒血症病毒糖蛋白酵母表面展示系统的建立》一文中研究指出:糖蛋白(Glycoprotein, G)作为鲤春病毒血症病毒(Spring Virernia of Carp Virus, SVCV)主要的抗原蛋白,已成为现阶段SVCV病毒检测、抗体制备以及疫苗研制的热点。为了对其进行酵母表面展示,研究以SVCVshlj1分离株基因组为模板,通过RT-PCR技术,体外扩增获得SVCV表面糖蛋白的基因开放阅读框(1530 bp)片段,将其克隆至酵母表面展示载体pYD1,构建重组质粒pYD1-G。利用电转化方法将重组质粒pYD1-G导入酿酒酵母EBY100感受态细胞,经YNB选择培养基筛选和菌液PCR的鉴定,挑选出阳性转化子(命名为EBY100-pYD1-G),对其进行2%半乳糖诱导。利用细胞免疫荧光和流式细胞仪检测G蛋白的酵母表面展示情况。细胞免疫荧光结果显示,诱导后的酵母细胞EBY100-pYD1-G能产生特异性红色荧光,且随着诱导时间的增加,红色荧光的酵母细胞所占比例不断增加,各组之间差异显著(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,酵母细胞的荧光强度与诱导时间呈正比,其中诱导48h与72h的酵母细胞荧光强度不存在显著差异,基本趋于稳定不变的状态。因此,选取诱导48h为酵母表面展示的最佳诱导时间。上述研究结果表明SVCV的G蛋白已经成功展示于酿酒酵母细胞表面,研究为鲤春病毒血症酵母口服疫苗的研发奠定了前期基础。

Abstract

tang dan bai (Glycoprotein, G)zuo wei li chun bing du xie zheng bing du (Spring Virernia of Carp Virus, SVCV)zhu yao de kang yuan dan bai ,yi cheng wei xian jie duan SVCVbing du jian ce 、kang ti zhi bei yi ji yi miao yan zhi de re dian 。wei le dui ji jin hang jiao mu biao mian zhan shi ,yan jiu yi SVCVshlj1fen li zhu ji yin zu wei mo ban ,tong guo RT-PCRji shu ,ti wai kuo zeng huo de SVCVbiao mian tang dan bai de ji yin kai fang yue dou kuang (1530 bp)pian duan ,jiang ji ke long zhi jiao mu biao mian zhan shi zai ti pYD1,gou jian chong zu zhi li pYD1-G。li yong dian zhuai hua fang fa jiang chong zu zhi li pYD1-Gdao ru niang jiu jiao mu EBY100gan shou tai xi bao ,jing YNBshua ze pei yang ji shai shua he jun ye PCRde jian ding ,tiao shua chu yang xing zhuai hua zi (ming ming wei EBY100-pYD1-G),dui ji jin hang 2%ban ru tang you dao 。li yong xi bao mian yi ying guang he liu shi xi bao yi jian ce Gdan bai de jiao mu biao mian zhan shi qing kuang 。xi bao mian yi ying guang jie guo xian shi ,you dao hou de jiao mu xi bao EBY100-pYD1-Gneng chan sheng te yi xing gong se ying guang ,ju sui zhao you dao shi jian de zeng jia ,gong se ying guang de jiao mu xi bao suo zhan bi li bu duan zeng jia ,ge zu zhi jian cha yi xian zhe (P<0.05)。liu shi xi bao yi jian ce jie guo xian shi ,jiao mu xi bao de ying guang jiang du yu you dao shi jian cheng zheng bi ,ji zhong you dao 48hyu 72hde jiao mu xi bao ying guang jiang du bu cun zai xian zhe cha yi ,ji ben qu yu wen ding bu bian de zhuang tai 。yin ci ,shua qu you dao 48hwei jiao mu biao mian zhan shi de zui jia you dao shi jian 。shang shu yan jiu jie guo biao ming SVCVde Gdan bai yi jing cheng gong zhan shi yu niang jiu jiao mu xi bao biao mian ,yan jiu wei li chun bing du xie zheng jiao mu kou fu yi miao de yan fa dian ding le qian ji ji chu 。

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自水生生物学报的林婧楠,赵景壮,刘淼,任广明,卢彤岩,徐黎明,发表于刊物水生生物学报2019年05期论文,是一篇关于鲤春病毒血症病毒论文,糖蛋白论文,酵母表面展示系统论文,流式细胞仪论文,水生生物学报2019年05期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自水生生物学报2019年05期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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