论文摘要
背景及目的: 熊果酸为五环三萜类化合物,广泛存在于中草药和食品中,具有广泛的生物学活性和药理学功效,如抗肿瘤、抗炎、免疫调节和恢复造血等。在熊果酸对机体免疫功能影响的研究中,You等发现熊果酸可通过促进巨噬细胞释放TNF-α和NO从而增强细胞免疫功能。辅助性淋巴细胞（Th细胞）在机体的免疫中起着极为关键的作用,尤其是通过分泌细胞因子调节免疫功能,目前尚无熊果酸对Th细胞影响的报道。本实验旨在研究熊果酸对正常人外周血淋巴细胞分泌Th1型细胞因子（IFN-γ,和IL-2）的影响,并检测Th1型细胞因子分泌过程中MAPK的变化,对机制作初步探讨。 方法: 采用密度梯度离心法分离正常人外周血单个核细胞,再用黏附法分离得到外周血淋巴细胞。实验分别用不同浓度熊果酸（5～30μM）及PHA/PMA刺激外周血淋巴细胞,采用MTT实验分析刺激24小时的淋巴细胞的增殖情况,双抗体夹心法ELISA和半定量RT-PCR分别检测Th1型细胞因子（IFN-γ和IL-2）分泌及mRNA表达的变化;Western Blot检测p38 MAPK的表达及活化水平。 结果: 淋巴细胞在不同浓度熊果酸作用后,各组细胞增殖无显著差异,而Th1型细胞因子（IFN-γ和IL-2）的分泌和mRNA的表达水平均随熊果酸浓度的增加呈浓度依赖性下降（P<0.05）,在高浓度熊果酸作用后,p38MAPK的活化水平出现显著性降低。 结论: 熊果酸在本研究浓度范围内对丝裂原活化的淋巴细胞增殖无影响,但显著抑制Th1型细胞因子的分泌和mRNA的表达,提示抑制可能是在转录和/或转录后水平发挥作用,抑制p38MAPK的活化可能是其机制之一。熊果酸和地塞米松分子结构相似,推测熊果酸可能通过类似地塞米松下调糖皮质激素受体发挥作用。熊果酸有可能用于自身免疫性疾病和超敏反应性疾病的防治。
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