氯胺酮对体外循环下先心病患者心肌热休克蛋白72mRNA表达的影响

论文摘要

目的：观察体外循环（cardiopulmonary bypass，CPB）期间，先心病患者心肌缺血／再灌注（ischemia／reperfusion，I／R）时诱导型一氧化氮合酶（induced nitric oxide synthase，iNOS）mRNA和热休克蛋白（heat shock protein，HSP）72mRNA表达的变化，及不同剂量的氯胺酮预处理对它们表达的影响，探讨氯胺酮心肌保护的机制。方法：拟行房间隔和／或室间隔缺损修补术患者36人，随机分为3组（各12人）：对照组（C组）和氯胺酮干预组（K1组、K2组）。在劈胸骨时、主动脉插管时和主动脉开放前5min，干预组分别静脉注射氯胺酮0.5mg·kg-1和1.0mg·kg-1，对照组注射等量生理盐水。于上腔静脉插管时（T1）、主动脉阻断后30min（T2）和主动脉开放后30min（T3）取适量心肌组织，应用一步法实时荧光定量RT-PCR技术（采用SYBR Green 1嵌合荧光法），检测心肌中iNOSmRNA和HSP72mRNA的表达量。并分别于T1、T2、T3和主动脉开放后2h（T4）取上腔静脉血4ml，检测血清中肌酸激酶（CK）和肌酸激酶同工酶（CK-MB）含量。结果：1．一般资料的比较：三组患者的年龄、性别、体重、手术类型、术前体温、体外循环时间和主动脉阻断时间等差异均无统计学意义（P＞0.05）。2．心肌iNOSmRNA表达的变化：iNOSmRNA的表达量，组内比较，三组在心肌缺血后（T2）和再灌注后（T3）均较缺血前（T1）显著升高（P＜0.01），再灌注后（T3）较缺血后（T2）显著升高（P＜0.01）；组间比较，在心肌缺血后（T2）和再灌注后（T3），氯胺酮干预组均显著低于对照组（P＜0.05），并且K2组较K1组显著降低（P＜0.05）3．心肌HSP72mRNA表达的变化：HSP72mRNA表达量，组内比较，三组患者在心肌缺血后（T2）和再灌注后（T3）均显著高于缺血前（T1）（P＜0.05），再灌注后（T3）显著高于缺血后（T2）（P＜0.05）；组间比较，在心肌缺血后（T2）和再灌注后（T3），氯胺酮干预组均显著高于对照组（P＜0.05），K1与K2组相比较差异无显著性（P＞0.05）。4．血清心肌酶的变化：血清心肌酶含量，组内比较，T2、T3、T4与T1比较，P＜0.01；T3、T4与T2比较，P＜0.01；T4与T3比较，P＜0.01。组间比较，三组患者在T1时间点差别无显著性（P＞0.05），在T2、T3、T4时间点K1、K2与C比较，P＜0.05，K1与K2比较差别无显著性（P＞0.05）。结论：体外循环触发了心肌的缺血再灌注损伤，iNOS和HSP72参与了心肌缺血再灌注损伤的发生和发展。麻醉和亚麻醉剂量的氯胺酮通过下调心肌iNOS mRNA的表达和上调心肌HSP72mRNA的表达，减少血清心肌酶的漏出，在一定程度上具有心肌保护作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 背景回顾
• 1 缺血再灌注损伤损伤的发生
• 2 氯胺酮
• 3 氯胺酮与缺血再灌注损伤损伤
• 3.1 氯胺酮抑制促炎性细胞因子的释放
• 3.2 氯胺酮抑制中性粒细胞（PMN）激活、粘附、呼吸爆发等活性
• 3.3 氯胺酮抑制 I/R 过程中细胞内钙超载
• 4 氯胺酮对心肌的影响
• 5 结语
• 材料与方法
• 1 研究对象
• 1.1 病例与分组
• 1.2 麻醉与监测
• 2 标本采集和指标测定
• 3 主要试剂与仪器
• 3.1 主要试剂
• 3.2 实验仪器
• 4 实验方法与步骤
• 4.1 引物设计
• 4.2 RNA 的提取
• 4.3 RT-PCR 扩增及产物分析
• 4.4 标准曲线的制作
• 4.5 一步法实时荧光定量 RT-PCR
• 5 统计学处理
• 结果
• 1 RT-PCR电泳结果
• 2 标准曲线
• 3 荧光定量RT-PCR结果
• 4 小结
• 5 三组患者一般资料的比较
• 6 三组患者心肌iNOSmRNA表达的比较
• 7 三组患者心肌HSP72mRNA表达的比较
• 8 三组患者血清CK、CK-MB含量比较
• 讨论
• 1 体外循环与心肌缺血再灌注损伤
• 2 热休克蛋白72在心肌缺血再灌注期间的产生及保护机制
• 3 诱导型一氧化氮合酶与热休克蛋白 72
• 4 氯胺酮与心肌保护
• 结论
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间论文发表目录
• 致谢
• 附录
• 附录一
• 附录二
• 附录三
• 附录四
• 缩略词