宋倩倩:真核表达MERS-CoV刺突蛋白亚单位的信号肽序列优化研究论文

宋倩倩:真核表达MERS-CoV刺突蛋白亚单位的信号肽序列优化研究论文

本文主要研究内容

作者宋倩倩,王文玲,詹瑛,鲁福娜,邓瑶,谭文杰(2019)在《真核表达MERS-CoV刺突蛋白亚单位的信号肽序列优化研究》一文中研究指出:中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)的刺突蛋白(Spike,S)亚单位1(S1)是引起宿主免疫反应和产生中和抗体的主要靶抗原,也是疫苗研发和病原检测的重要靶标,选用适宜的真核表达系统高效表达S1蛋白是进行相关研究的基础。为确定MERS-CoV S1在哺乳动物细胞中高效分泌性表达的信号肽序列,构建了含高斯荧光素酶(Gaussia luciferase,GLuc)、人组织纤溶酶原激活剂(Tissue plasminogen activator,tPA)及小鼠免疫球蛋白G的2a亚型(Mouse immunoglobular G subtype 2a,MIgG2a)7个信号肽(原始序列和改造序列)序列的MERS-CoV S1表达质粒,瞬时转染细胞后,通过Western Blot检测并比较细胞培养上清和裂解液中S1的表达水平及分泌表达效率(条带密度灰度扫描比),并对哺乳动物细胞表达的S1蛋白的纯度与抗原特性进行了分析。结果表明7种信号肽在293T、BHK21和ExpiCHO-STM三种细胞系统中介导MERS-CoV S1的高效分泌表达的效率各有不同,其中tPA-1信号肽介导S1抗原在ExpiCHO-STM中具有较高的分泌表达效率与产量,纯化的S1蛋白保持了较好的抗原性。本研究为进一步研发基于MERS-CoV S1的亚单位疫苗及免疫学检测试剂奠定了基础。

Abstract

zhong dong hu xi zeng ge zheng guan zhuang bing du (Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)de ci tu dan bai (Spike,S)ya chan wei 1(S1)shi yin qi su zhu mian yi fan ying he chan sheng zhong he kang ti de zhu yao ba kang yuan ,ye shi yi miao yan fa he bing yuan jian ce de chong yao ba biao ,shua yong kuo yi de zhen he biao da ji tong gao xiao biao da S1dan bai shi jin hang xiang guan yan jiu de ji chu 。wei que ding MERS-CoV S1zai bu ru dong wu xi bao zhong gao xiao fen bi xing biao da de xin hao tai xu lie ,gou jian le han gao si ying guang su mei (Gaussia luciferase,GLuc)、ren zu zhi qian rong mei yuan ji huo ji (Tissue plasminogen activator,tPA)ji xiao shu mian yi qiu dan bai Gde 2aya xing (Mouse immunoglobular G subtype 2a,MIgG2a)7ge xin hao tai (yuan shi xu lie he gai zao xu lie )xu lie de MERS-CoV S1biao da zhi li ,shun shi zhuai ran xi bao hou ,tong guo Western Blotjian ce bing bi jiao xi bao pei yang shang qing he lie jie ye zhong S1de biao da shui ping ji fen bi biao da xiao lv (tiao dai mi du hui du sao miao bi ),bing dui bu ru dong wu xi bao biao da de S1dan bai de chun du yu kang yuan te xing jin hang le fen xi 。jie guo biao ming 7chong xin hao tai zai 293T、BHK21he ExpiCHO-STMsan chong xi bao ji tong zhong jie dao MERS-CoV S1de gao xiao fen bi biao da de xiao lv ge you bu tong ,ji zhong tPA-1xin hao tai jie dao S1kang yuan zai ExpiCHO-STMzhong ju you jiao gao de fen bi biao da xiao lv yu chan liang ,chun hua de S1dan bai bao chi le jiao hao de kang yuan xing 。ben yan jiu wei jin yi bu yan fa ji yu MERS-CoV S1de ya chan wei yi miao ji mian yi xue jian ce shi ji dian ding le ji chu 。

论文参考文献

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  • 论文详细介绍

    论文作者分别是来自病毒学报的宋倩倩,王文玲,詹瑛,鲁福娜,邓瑶,谭文杰,发表于刊物病毒学报2019年01期论文,是一篇关于信号肽论文,中东呼吸综合征冠状病毒论文,刺突蛋白论文,分泌表达论文,病毒学报2019年01期论文的文章。本文可供学术参考使用,各位学者可以免费参考阅读下载,文章观点不代表本站观点,资料来自病毒学报2019年01期论文网站,若本站收录的文献无意侵犯了您的著作版权,请联系我们删除。

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