当归多糖的制备、结构分析和抗辐射效应研究

论文摘要

当归（Radix Angelica sinesis）为伞形科（Umbrelliferae）草本植物,具有多种生理功能,在我国自古至今一直被广泛用于多种疾病的治疗,素有“十方九归”之称。当归多糖是当归的主要生物活性成分。目前国内对当归多糖的研究主要侧重于调节免疫力、抗癌等药理和功效,对其结构研究较少,且不够深入。本论文对甘肃岷归多糖的制备、结构特征和抗辐射效应进行了研究,研究结果如下:分析了原料当归的化学组成:水分11.0%,粗蛋白18.5%,粗脂肪3.8%,灰分8.1%,纤维素9.6%,还原糖37.7%,多糖10.1%。比较了水提粗多糖W-ASP和EDTA/碱提粗多糖E-ASP的得率和提取率:W-ASP得率为10.8%,占总得率（15.2%）的71.1%;E-ASP得率为4.4%,占总得率的28.9%,表明W-ASP是粗多糖的主要组成部分。W-ASP的提取率为5.7%,占当归多糖总含量（10.1%）的56.4%;E-ASP提取率为1.8%,占总量的17.8%。W-ASP和E-ASP的化学组成分别为:多糖54.36%/43.82%,糖醛酸24.80%/36.26%,蛋白8.34%/14.40%,灰分21.66%/19.73%。中性糖由Gal、Ara、Glc、Rha和少量Man组成。E-ASP的糖醛酸、蛋白质以及Glc含量高于W-ASP。选用外周血白细胞和淋巴细胞数量以及体重作为W-ASP和E-ASP的抗辐射活性筛选指标。实验结果表明,W-ASP和E-ASP对经3.0 Gy 60Coγ射线照射小鼠的外周血白细胞、淋巴细胞均有保护作用,对体重的回升也有促进作用,但E-ASP的效果不如W-ASP。运用响应面分析方法,确定了当归水提粗多糖的最佳工艺参数:浸提温度85°C,浸提时间2 h,浸提2次,料水比1:10。对水提当归粗多糖的分级纯化和化学组成进行了研究。W-ASP经DEAE-Sepharose CL-6B柱层析分级后得到3个多糖组分:W-ASP1为中性多糖,W-ASP2为弱酸性多糖（糖醛酸含量35.38%）,W-ASP3为酸性多糖（糖醛酸含量58.27%）。W-ASP3是当归多糖的主要组分,蛋白含量为2.53%,主要由Gal、Ara和Rha组成,以及极少量的Glc和Man;HPLC凝胶过滤色谱分析表明W-ASP3为均一组分,分子量约为95 KDa;HPAEC-PAD色谱分析结合单糖组成和IR图谱确定是一种果胶多糖。分别采用比色法、GC-MS和HPAEC-PAD色谱技术测定了当归果胶多糖W-ASP3的糖醛酸含量,并对三种检测方法进行比较。HPAEC-PAD法（53.62%）和GC-MS法（56.06%）测定的GalA含量均略低于比色法（58.27%）。采用傅里叶变换红外光谱法（FT-IR）测定了当归多糖样品的酯化度（DE）。通过建立DE与A1730/（A1730+A1630）之间的线性回归方程（R2 = 0.822）,测得当归粗多糖及其分级组分的酯化度介于42.36% 54.06%之间。将FT-IR法与化学滴定法进行了比较,两种方法测得的DE值之间的相对误差在8%左右。

论文目录

• 缩写符号说明
• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一章 绪论
• 1.1 当归概述
• 1.2 果胶多糖概述
• 1.3 电离辐射概述
• 1.4 立题背景和意义
• 1.5 本论文研究的主要内容
• 参考文献
• 第二章 当归多糖的提取及其抗辐射活性的筛选
• 2.1 前言
• 2.2 材料与设备
• 2.3 实验方法
• 2.4 结果与讨论
• 2.5 本章小结
• 参考文献
• 第三章 当归多糖的纯化、组成分析及活性组分的筛选
• 3.1 前言
• 3.2 材料与设备
• 3.3 实验方法
• 3.4 结果与讨论
• 3.5 本章小结
• 参考文献
• 第四章 当归多糖对亚急性和亚慢性辐射损伤小鼠的防护作用及其辐射防护机制探讨
• 4.1 前言
• 4.2 材料与设备
• 4.3 当归多糖W-ASP3 的制备
• 4.4 体外抗辐射活性测定（细胞培养法）
• 4.5 体内亚急性辐射防护作用研究
• 4.6 体内亚慢性辐射防护作用研究
• 4.7 统计分析
• 4.8 结果与讨论
• 4.9 本章小结
• 参考文献
• 第五章 当归多糖W-ASP3的结构分析及其构效关系初探
• 5.1 前言
• 5.2 材料与设备
• 5.3 实验方法
• 5.4 当归多糖W-ASP3 抗辐射功能的构效关系初探
• 5.5 结果与讨论
• 5.6 本章小结
• 参考文献
• 主要结论
• 论文创新点
• 攻读博士学位期间发表的论文
• 致谢