论文摘要
目的:研究Aβ25-35诱导的AD大鼠认知功能障碍、海马组织形态、及TRAIL蛋白表达的变化,进一步阐明AD的发病机制。方法:（1）实验动物模型:根据文献报道,选用智能正常的健康雌性Wistar大鼠,麻醉成功后,固定于脑立体定向仪上,头顶部正中切口暴露前囟。参照大鼠脑立体定向仪图谱,双侧海马注射Aβ25-35各1ul（5ug）。13天后,进行morris水迷宫训练5天,记录第五天的逃避潜伏期,明显高于假手术组,说明造模成功。（2） Aβ25-35诱导大鼠AD的实验:将75只大鼠,随机分为正常组、模型组、雌激素治疗组,共3组。模型组及雌激素治疗组双侧海马各注射1ul的Aβ25-35。手术后第二天,雌激素治疗组予苯甲酸雌二醇（1mg/kg.d）肌注。给药后13天,各组进行morris水迷宫训练5天,记录成绩。实验结束后,将大鼠麻醉,予4%多聚甲醛进行心脏灌注,取脑,制作病理标本,光镜观察海马组织形态学,免疫组织化学法检测海马TRAIL的表达。结果:1.大鼠认知功能的观察Morris水迷宫成绩测试,随着训练的进行,各组大鼠逃避潜伏期逐渐缩短。记录第5天成绩,Aβ组与正常组相比,逃避潜伏期明显延长,撤离平台后大鼠在原平台象限内游泳的时间占整个游泳时间的百分比显著降低,穿过平台所在位置的次数明显减少,P＜0.01;给予雌激素治疗后,与Aβ组相比,逃避潜伏期明显缩短,大鼠在原平台象限内游泳的时间占整个游泳时间的百分比显著升高,穿过平台所在位置的次数明显增加,P＜0.05。2.大鼠海马组织病理学观察HE染色显示,Aβ组大鼠海马CA1-CA4区及齿状回神经元数量较正常组明显减少,可见较多的神经细胞胞质浓染,核固缩。雌激素治疗组神经元数量较Aβ组增多,胞质浓染神经元少见。3.免疫组织化学法检测大鼠海马组织TRAIL的表达注射Aβ25-35后,大鼠海马区TRAIL的表达明显增加,与正常组相比较,P＜0.01。给予雌激素后,TRAIL蛋白的表达明显降低,P＜0.01。各组间TRAIL蛋白免疫反应强度光密度比较,Aβ组较正常组明显增高,二者有显著性差异,P＜0.01;与Aβ组相比,雌激素组有显著性差异,P＜0.01。结论:Aβ25-35所致AD大鼠模型出现明显认知功能障碍,海马组织中TRAIL蛋白的表达明显增多,通过雌激素的作用,TRAIL蛋白表达减少,大鼠学习记忆功能改善,提示AD与TRAIL诱导的神经元凋亡有明显关系,雌激素通过抑制TRAIL的表达,减少神经元凋亡,达到治疗AD的目的。
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