鸡血藤促进造血功能的物质基础和机制研究

论文摘要

鸡血藤是传统中药中一味典型的活血化瘀药，主产于广东、广西、云南等省。鸡血藤性温，味苦、甘，归肝、肾经，具有补血、活血、通络之功效，在民间常用来治疗腰膝酸痛、麻木瘫痪、血虚萎黄及月经不调等疾病。现代药理研究表明：鸡血藤有抑制血小板聚集、降低血压、抗心律失常等作用。临床常用鸡血藤(单用或以鸡血藤为主组方)治疗各种原因(如放化疗、血液系统疾病)引起的白细胞、血小板及红细胞等全血象减少疾病。 关于鸡血藤的本草考证，过去研究较为混乱，鸡血藤的原植物分属于豆科和五味子科。直至1995年，《中华人民共和国药典》1995年版将鸡血藤定为豆科植物密花豆Spatholobus suberectus Dunn的干燥藤茎，解决了其本草考证的争议。与本草考证类似，鸡血藤的化学成分研究也十分不足。资料表明，近年仅有少数研究对鸡血藤的化学成分进行了初步分析，但对其具体药效成分还不明确。虽然《中华人民共和国药典》2005年版中以芒柄花素作为鸡血藤鉴别的标准之一，但目前研究尚不能确定其即为鸡血藤促进造血功能的有效成分。由于有效成分的不明确，造成了目前研究对鸡血藤促进造血功能的作用机理的不明确。 针对以上现状，本论文首先系统研究了鸡血藤的促进造血功能的物质基础，通过有机溶剂提取、硅胶层析和凝胶层析，分离得到了鸡血藤的促进造血功能的有效成分，通过液质、红外光谱和核磁共振方法对鸡血藤的有效成分鉴定了结构鉴定。在以上研究的基础上，本论文进一步并对鸡血藤有效成分的促进造血功能作用机理，采用多种动物模型，在实验动物整体、细胞和分子水平上进行了详细的研究，基本明确了鸡血藤有效成分的作用机理。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 综述
• 第一部分 鸡血藤的研究进展
• 1 鸡血藤的本草考证
• 2 鸡血藤植物的形态特征
• 3 鸡血藤的化学成分研究
• 4 鸡血藤的药理研究
• 第二部分 儿茶素类物质的研究进展
• 1 儿茶素类物质的生物学功能
• 2 儿茶素类物质的制备
• 3 儿茶素类物质的应用
• 第三部分 造血调控的研究进展
• 1 影响造血的细胞因子
• 2 细胞因子对造血系统网络调控的特点
• 3 骨髓微环境对造血调控的影响
• 参考文献
• 实验部分
• 第一章 鸡血藤有效成分的提取分离及筛选
• 摘要
• 关键词
• 前言
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果
• 2.1 EtOH提取物对复合贫血小鼠模型外周血象的影响
• 2.2 EtOH提取物不同萃取液对复合贫血小鼠模型外用血象的影响
• 2.3 EtOAc萃取浸膏提取物对复合贫血小鼠模型外周血象的影响
• 2.4 硅胶H60层析柱分离成分对复合贫血小鼠模型外周血象的影响
• 2.5 Sephadex LH-20分离纯化有效部分
• 2.6 成分鉴定
• 3 讨论
• 参考文献
• 第二章 儿茶素对小鼠外周血象的影响
• 摘要
• 关键词
• 前言
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果
• 2.1 儿茶素对复合贫血模型小鼠外周血象的影响
• 2.2 儿茶素对环磷酰胺所致贫血模型小鼠外周血象的影响
• 2.3 儿茶素对失血性贫血小鼠红细胞数、血红蛋白影响的试验
• 3 讨论
• 参考文献
• 第三章 在细胞水平探讨儿茶素对小鼠造血功能的影响
• 第一节 儿茶素对正常和贫血小鼠骨髓细胞增殖能力的影响
• 摘要
• 关键词
• 前言
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果
• 2.1 对正常和贫血小鼠骨髓有核细胞增殖的影响
• 3 讨论
• 参考文献
• 第二节 儿茶素对小鼠骨髓造血干细胞的影响
• 摘要
• 关键词
• 前言
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果
• 2.1 脾结节数计数
• 3 讨论
• 参考文献
• 第三节 儿茶素对小鼠造血祖细胞形成的影响
• 摘要
• 关键词
• 前言
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果
• 2.1 儿茶素对小鼠造血祖细胞集落形成的影响
• 3 讨论
• 参考文献
• 第四节 儿茶素对小鼠分泌细胞因子的影响
• （一） 儿茶素对小鼠分泌集落刺激因子的影响
• 摘要
• 关键词
• 前言
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果
• 2.1 SCM对正常和贫血小鼠骨髓有核细胞增殖的影响
• 2.2 LCM对正常和贫血小鼠骨髓有核细胞增殖的影响
• 2.3 PMφCM对正常和贫血小鼠骨髓有核细胞增殖的影响
• 2.4 SMCM对正常和贫血小鼠骨髓有核细胞增殖的影响
• 3 讨论
• （二） 儿茶素对小鼠细胞分泌IL-1,IL-2,IL-3的影响
• 摘要
• 关键词
• 前言
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果
• 2.1 儿茶素对小鼠腹腔巨噬细胞产生IL-1的影响
• 2.2 儿茶素对小鼠脾淋巴细胞产生IL-2的影响
• 2.3 儿茶素对小鼠脾淋巴细胞产生IL-3的影响
• 3 讨论
• （三） 儿茶素对促红细胞生成素生成的影响
• 摘要
• 关键词
• 前言
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果
• 2.1 儿茶素对小鼠脾条件培养液中红细胞生成素的影响
• 2.2 儿茶素对小鼠腹腔巨噬细胞培养液（PMφCM）中红细胞生成素的影响
• 3 讨论
• （四） 儿茶素对小鼠骨髓基质细胞分泌肿瘤坏死因子的影响
• 摘要
• 关键词
• 前言
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果
• 2.1 儿茶素对小鼠骨髓基质细胞产生TNF的影响
• 3 讨论
• 参考文献
• 第四章 在分子水平探讨儿茶素对小鼠造血功能的影响
• 60Coγ射线照射小鼠骨髓细胞及脾细胞凋亡的影响'>第一节 儿茶素对⁶⁰Coγ射线照射小鼠骨髓细胞及脾细胞凋亡的影响
• 摘要
• 关键词
• 前言
• 1 材料与方法
• 1 .1实验材料
• 1.2 实验方法
• 2 结果
• 2.1 儿茶素对照射后小鼠骨髓细胞不同时间点细胞凋亡的影响
• 2.2 儿茶素对照射后小鼠脾细胞不同时间点细胞凋亡的影响
• 3 讨论
• 参考文献
• 第二节 儿茶素对小鼠基因差异表达的研究
• 摘要
• 关键词
• 前言
• 1 材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 方法
• 2 结果
• 2.1 总RNA的质量分析
• 2.2 DNA荧光标记
• 2.3 芯片杂交及图像采集
• 2.4 数据分析
• 3 讨论
• 3.1 儿茶素对细胞器相关蛋白基因的影响
• 3.2 儿茶素生物膜相关基因的影响
• 3.3 儿茶素对细胞周期相关蛋白基因的影响
• 3.4 儿茶素对信号传导相关蛋白基因的影响
• 3.5 儿茶素对酶活性相关蛋白基因的影响
• 3.6 儿茶素对细胞凋亡相关蛋白基因的影响
• 3.7 儿茶素对免疫相关蛋白基因的影响
• 3.8 儿茶素对代谢相关蛋白基因的影响
• 3.9 儿茶素对离子通道相关蛋白基因的影响
• 3.10 儿茶素对DNA复制、转录、修复相关蛋白基因的影响
• 3.11 儿茶素对转运基因的影响
• 参考文献
• 结论
• 在读期间发表论文、申请专利及获奖情况
• 致谢