短额负蝗配子发生过程中凝集素受体的分布变化研究

论文摘要

短额负蝗(Atractomorpha sinensis Bolivar)属直翅目(Orthoptera)蝗总科(Acridoidea)锥头蝗科(Pyrgomorphidae),全国各地均有分布,而且在不少地区为优势种蝗虫。它是多食性植食昆虫,主要危害一些粮食作物、经济作物、蔬菜等,对农业造成很大的危害。另一方面,短额负蝗是我国传统食用的主要蝗虫种类之一,营养价值颇高,具有一定的开发和利用价值。本文以短额负蝗为研究材料,首次利用细胞学、形态解剖学、凝集素亲合细胞化学等方法对其配子发生的显微结构、配子发生过程中糖复合物的表达定位以及雌虫受精囊等方面进行了系统研究,旨在深入了解短额负蝗配子发生及发育机制,为进一步对其进行开发利用及害虫防治等方面提供理论依据。 本文首次应用HE染色方法对直翅目昆虫短额负蝗的精子发生进行了显微结构观察,结果表明,短额负蝗精子发生过程经历了精原细胞增殖期、初级精母细胞期、次级精母细胞期、精子形成期和精子成熟期5个时期。在这5个时期中,各期生精细胞的大小、形念、核染色体等变化明显,并且发现在精子发生后期有染色质凝聚现象,这一现象的出现可能是与精子的运动功能相适应的。利用同样方法对其卵子发生过程进行研究,可得出以下结果:短额负蝗卵子发生过程可分为三个时期八个阶段,三个时期为卵母细胞分化期、卵母细胞生长期和卵母细胞卵黄形成期。在卵子发生的整个过程中,卵母细胞和滤泡细胞形态变化都非常明显,而且两者共同参与了卵母细胞中卵黄蛋白的形成,即短额负蝗卵黄蛋白形成是自体合成和异体合成同时存在。此外,在卵母细胞生长期发现有卵母细胞凋亡现象,即周围的滤泡细胞侵入并填充卵母细胞质,卵母细胞胞质分布不均匀,而且有大量泡状物质形成,卵母细胞凋亡现象可能是对周围不良上不境的一种适应。 通过5种凝集素对短额负蝗卵子发生过程中糖复合物的分布变化研究表明,在卵子发生整个过程中没有UEA受体的表达,RCA Ⅰ、WGA、PNA、SBA受体均参与卵子发生过程,这4种不同受体在卵子发生过程中呈阶段性分布,且各自的分布模式具有差异性。在卵母细胞分化期仅有RCA Ⅰ受体的表达;在卵母细胞生长期,WGA、SBA、PNA受体陆续出现于卵母细胞胞质内,且WGA、SBA、RCA Ⅰ受体表达量达最大;进入卵黄形成期,卵母细胞内糖复合物的表达量均减少;PNA受体仅出现在卵母细胞生长期的第二阶段和卵黄形成期的第五阶段;成熟卵子中,PNA、RCA Ⅰ、WGA、SBA受体又不同程度重新出现于卵黄膜,卵黄膜上的糖复合物可能与精卵识别有关。在卵子发生过程中伴随着一些糖复合物的出现和另一些

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 第一章 绪论
• 1 引言
• 2 基本概念
• 2.1 昆虫卵巢的结构
• 2.2 昆虫精巢的结构
• 2.3 卵子发生
• 2.4 精子发生
• 2.5 配子发生的分期
• 2.5.1 卵子发生的分期
• 2.5.2 精子发生的分期
• 2.6 受精囊
• 2.7 凝集素与凝集素受体
• 第二章 短额负蝗精卵发生的显微结构观察
• 1.材料与方法
• 1.1 实验材料
• 1.2 实验方法与流程
• 2.结果与讨论
• 2.1 卵子发生的显微结构观察与讨论
• 2.1.1 卵巢的组织结构
• 2.1.2 卵子发生的阶段划分
• 2.1.3 卵子发生过程中卵母细胞凋亡
• 2.1.4 分析与讨论
• 2.1.4.1 卵子发生过程中卵母细胞的变化
• 2.1.4.2 卵子发生过程中滤泡细胞的变化
• 2.1.4.3 卵子发生过程中卵母细胞凋亡现象
• 2.2 精子发生的显微结构观察与讨论
• 2.2.1 精巢的外部形态
• 2.2.2 精子发生的分期
• 2.2.3 分析与讨论
• 第三章 凝集素受体在短额负蝗精卵发生中的研究
• 1 植物凝集素及其受体在生殖细胞发生过程中的研究概况
• 1.1 植物凝集素的基本特征及其分类
• 1.2 植物凝集素在生殖细胞表面糖复合物检测中的应用
• 1.2.1 哺乳动物
• 1.2.2 两栖类及爬行类
• 1.2.3 人类
• 1.2.4 昆虫
• 1.3 总结
• 2 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验原理
• 2.3 实验试剂
• 2.4 实验流程
• 2.5 对照处理
• 2.6 图像分析与结果处理
• 3 实验结果与分析
• 3.1 短额负蝗卵子发生过程中凝集素受体的分布与变化
• 3.1.1 实验结果
• 3.1.1.1 RCAI标记结果
• 3.1.1.2 PNA标记结果
• 3.1.1.3 WGA标记结果
• 3.1.1.4 SBA标记结果
• 3.1.1.5 UEA标记结果
• 3.1.1.6 各反应受体阳性表达强度比较
• 3.1.2 分析与讨论
• 3.2 短额负蝗精子发生过程中凝集素受体的分布变化
• 3.2.1 实验结果
• 3.2.1.1 RCAI标记结果
• 3.2.1.2 UEA标记结果
• 3.2.1.3 SBA标记结果
• 3.2.1.4 WGA标记结果
• 3.2.1.5 PNA标记结果
• 3.2.1.6 各反应受体阳性表达强度比较
• 3.2.2 分析与讨论
• 第四章 短额负蝗受精囊的显微结构观察
• 1 昆虫受精囊的研究概况
• 2 材料与方法
• 2.1 实验材料
• 2.2 实验方法
• 3 实验结果
• 3.1 外部形态观察
• 3.2 显微结构观察
• 4 分析与讨论
• 总结
• 参考文献
• 图版与图版说明
• 致谢
• 攻读硕士期间研究成果