论文摘要
桦褐孔菌Inonotus obliquus（Fr.）Pil（?）t是十分珍稀而又名贵的药用真菌,在分类学上隶属于担子菌亚门（Basidiomycotina）、层菌纲（Hymenomycetes）、非褶菌目（Aphyllophorales）、刺革菌科（Polyporaceae）、褐卧孔菌属（Poria hypobrunnea Petch）。主要分布在北半球北纬45°～50°地区。药用部分为菌核,桦褐孔菌多糖是桦褐孔菌的主要药效成分之一,具有抑制细胞周期,降血糖等作用。近年来由于大量采摘及医药开发,野生资源已远远不能满足市场对桦褐孔菌的需求,且野生桦褐孔菌中多糖含量仅为1.8%,如何培养出菌核产量高、多糖含量高的桦褐孔菌优良菌株是当务之急。本试验以桦褐孔菌菌株JL01为试验材料,对JL01菌丝体片段进行紫外线及60Co-γ辐照处理,以多糖含量为主要指标,筛选桦褐孔菌优良多糖高产菌株,并通过过氧化物同工酶及RAPD对筛选出的优良多糖高产菌株及原菌株进行分子鉴定。试验结果表明:经过紫外线照射3次、照射时间分别为20min与25min处理所得到的桦褐孔菌菌株为紫外线照射筛选出的2株桦褐孔菌优良多糖高产菌株,将其分别命名为JLZ1、JLZ2;在60Co-γ辐照剂量为1000Gy、剂量率为48.31Gy/min时所得到的菌株为60Co-γ辐照所选育出的桦褐孔菌优良多糖高产菌株,将其命名为JLC1;过氧化物同工酶试验结果表明:诱变菌株及原菌株在酶谱上有6条共有酶带,特别是JL01所拥有的6条酶带在JLZ1、JLZ2、JLC1的酶谱上均可以找到,但JLZ1、JLZ2、JLC1之间酶带数量、表达位置都完全相同,只是酶带深浅存在差异,说明诱变菌株的遗传物质发生了改变;RAPD技术对诱变菌株及原菌株的扩增结果表明:6个随机引物共扩增出74条带,多态性条带数为28条,说明RAPD技术可用于桦褐孔菌诱变菌株的鉴定。6个随机引物均显示出诱变菌株有异于原菌株的特征带,这表明原菌株经紫外线、60Co-γ辐照后遗传物质发生了变化,与过氧化物同工酶结果基本一致,可以判定是突变株。