论文摘要
前言 端粒酶(Telomerase)是一种核糖核蛋白酶,它由RNA和蛋白质组成,且能以自身RNA成分为模板催化合成TTAGGG重复序列,添加到真核细胞染色体末端,弥补细胞分裂时端粒DNA的丢失,维持端粒的长度和染色体稳定,使细胞寿命延长。正常人体细胞(非生殖细胞)细胞中端粒酶活性的表达很低,用一般的方法几乎检测不到,大多数永生化细胞和90%以上的恶性肿瘤细胞表达端粒酶活性。恶性肿瘤细胞中端粒酶活性增高是细胞增殖失控的关键,因此,端粒酶成为抗肿瘤药物的新靶点。 端粒酶活性调节可表现在不同水平上。实验证明抑制端粒酶活性可以抑制肿瘤细胞生长,端粒酶与肿瘤细胞生长、繁殖、衰老及肿瘤发生密切相关。Hela细胞(人宫颈癌细胞)因其端粒酶活性易于测量成为研究端粒酶的常用细胞。 天冬氨酸和谷氨酸是人体内常见的氨基酸,它们属于酸性氨基酸,是蛋白质在人体内代谢的产物,参与机体内多种代谢过程。我们在预实验中发现Asp等氨基酸可改变端粒酶活性,影响细胞生长,目前尚无文献进行此类研究的报道。端粒酶的活性受到各种因素的调节,本研究旨在观察天冬氨酸和谷氨酸两种酸性氨基酸对端粒酶活性的影响,为氨基酸与恶性肿瘤发生的关系提供科学依据。 实验材料与方法 实验材料 1.1 细胞:人宫颈癌细胞株(Hela)由中国医科大学实验中心三部提供。 1.2 主要试剂:天冬氨酸、谷氨酸、CHARPS、AEBSF均购于美国Sigma公司;PCR试剂盒购于日本Takara公司;其它常规试剂均为国产分析纯。
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