慢性束缚应激对脑区NMDA受体及生长相关蛋白的影响和逍遥散的调节作用

论文摘要

引言:慢性应激影响人们的日常生活,但却无法避免,是生命为生存和发展所必须存在的。对慢性应激致病机理的深刻认识,有助于相关防治措施的研究,以保护人们的身心健康。随着现代社会竞争的日趋激烈,人们因抑郁引起的疾病日渐增多,大都与慢性应激有密切的关系。慢性应激能引起机体神经-内分泌-免疫等系统广泛的变化,其中,中枢神经可塑性的变化是导致应激反应各种变化的原因之一。海马是慢性应激反应的主要调节中枢和受影响中枢,海马和杏仁核在关于学习和情绪等方面又有密切的联系。因此,研究慢性应激抑郁动物模型和调节慢性应激药物之间的关系,对于临床实践具有重要的指导意义。目的:本课题通过理论研究和实验研究两大部分,探讨慢性束缚应激引起中枢神经系统突触可塑性结构和功能在海马和杏仁核中变化的机理。本课题主要研究慢性束缚应激时兴奋性谷氨酸受体NMDAR[ N-甲基-D-天（门）冬氨酸受体（N-methyl-D-aspartic acid receptor）,NMDAR],主要是NMDAR2A（NR2A）和NMDAR2B（NR2B）亚基,突触生长相关蛋白GAP-43,Nogo-A变化的规律,同时运用逍遥散对其进行干预,观察中药对它们的调节作用,以期揭示慢性应激影响突触可塑性的内在机理,以及中药复方逍遥散对肝郁症的分子水平调节机制。方法:1理论研究主要探讨了以下几个方面的内容:①应激的概念及分期;②应激反应对机体的影响;③应激反应对神经系统的影响;④应激反应的调节与控制;⑤中医肝脏的现代研究进展;⑥中医对应激的认识研究。2实验研究2.1第一部分:探讨慢性束缚应激大鼠的饮食和体重的变化及逍遥散的影响。本实验目的在于:探讨慢性束缚应激状态下大鼠行为学变化以及慢性束缚应激时大鼠进食量和体重的变化,同时对其一般情况进行评价。将雄性SD大鼠72只,随机分为7天正常对照组（A组）、21天正常对照组（B组）、7天模型组（C组）、21天模型组（D组）、7天逍遥散组（E组）、21天逍遥散组（F组）共6组,每组各12只。实验所用的中药复方选用《太平惠民和剂局方》中的逍遥散〔北柴胡30g、当归30g、白芍30g、白术30g、茯苓30g、炙甘草15g、生姜l0g、薄荷l0g〕,将以上药物按一定的工艺制成药粉备用。以慢性束缚方法制作应激大鼠模型,将大鼠束缚于特制的束缚架上,每日3小时,连续21天（A,C,E组为7天）。自造模第一日始,各用药组（E和F）每日在束缚前1小时分别灌服逍遥散5.82g/kg,灌胃容积为10ml/kg,其它各组则灌服等体积的蒸馏水。一周后,A、C、E组取材,其余3周后取材。每日称量大鼠体重,计算进食量,观察其一般状况。2.2第二部分:免疫组织化学（漂浮染色,SP法）方法检测海马和杏仁核（基底外侧杏仁核）中NR2A,NR2B,GAP-43和Nogo-A的变化以及逍遥散的调节作用。大鼠分组和造模方法同第一部分。实验结束时,大鼠常规用3.0%戊巴比妥钠（40mg/kg）麻醉,以4%

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 英文缩略语表
• 综述一 慢性应激对脑区海马和杏仁核神经元影响的研究
• 综述二 应激对中枢神经系统可塑性影响机理的探讨
• 综述三 中医药在应激研究中的近况
• 前言
• 理论研究
• 实验研究 慢性束缚应激对脑区ＮＭＤＡ受体及生长相关蛋白的影响和逍遥散的调节作用
• 实验一慢性束缚应激大鼠模型的建立
• １材料与方法
• ２结果
• ３讨论
• 参考文献
• 实验二慢性束缚应激对脑区ＮＭＤＡＲ２Ａ和ＮＭＤＡＲ２Ｂ的影响和逍遥散的调节作用
• １材料与方法
• ２结果
• ３讨论
• 参考文献
• 实验三慢性应激对脑区ＧＡＰ－４３和Ｎｏｇｏ－Ａ蛋白的影响和逍遥散的调节作用
• １材料与方法
• ２结果
• ３讨论
• 参考文献
• 实验四逍遥散对慢性束缚应激大鼠相关脑区ＮＭＤＡＲ２Ａ和ＮＭＤＡＲ２Ｂ蛋白作用的调节机理
• １材料与方法
• ２结果
• ３讨论
• 参考文献
• 实验五逍遥散对慢性束缚应激大鼠相关脑区ＧＡＰ－４３和Ｎｏｇｏ－Ａ蛋白作用的调节机理
• １材料和方法
• ２结果
• ３讨论
• 参考文献
• 实验六逍遥散对慢性束缚应激大鼠相关脑区ＮＭＤＡＲ２Ａ和ＮＭＤＡＲ２ＢｍＲＮＡ基因表达的调节作用
• １材料与方法
• ２结果
• ３讨论
• 参考文献
• 实验七逍遥散对慢性束缚应激大鼠相关脑区GAP-43和Ｎｏｇｏ－ＡｍＲＮＡ基因表达的调节作用
• １材料与方法
• ２结果
• ３讨论
• 参考文献
• ＲＴ－ＰＣＲ的部分实验图像
• 总结
• 致谢
• 个人简历
• 附图