亚慢性染铝致大鼠肝损伤的研究

亚慢性染铝致大鼠肝损伤的研究

论文摘要

为探讨染铝对大鼠肝脏结构和功能的影响,将60只110g120g清洁级Wistar大鼠随机分为四组,对照组(蒸馏水),低剂量组(64.18mg/kg,Al3+),中剂量组(128.36mg/kg,Al3+)和高剂量组(256.72mg/kg,Al3+),通过饮水染铝的方式复制亚慢性染铝大鼠模型,实验期120d。记录大鼠临床症状和体重;全自动生化分析仪检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)活性及总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、胆汁酸(TBA)含量;分光光度法检测血清和肝脏谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;石墨炉原子吸收法和火焰原子吸收法检测肝脏铝(Al)、铁(Fe)、锌(Zn)、铜(Cu)元素含量;流式细胞术测定肝细胞凋亡指数,免疫组织化学法和半定量RT-PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax蛋白及其mRNA的表达量;并对染铝大鼠肝脏显微及超微结构进行观察。结果表明:1.临床观察大鼠精神沉郁、食欲减退、生长缓慢,体重明显下降,肝脏脏器系数降低,表明染铝抑制大鼠生长发育。2.染铝大鼠肝脏肝细胞肿胀、排列紊乱,细胞脂肪变性,出现空泡,血窦中散在红细胞;细胞核皱缩,核膜内陷,胞质内溶酶体增多、脂滴增多,粗面内质网减少,线粒体肿胀、板层减少,线粒体嵴模糊,表明染铝可致大鼠肝脏结构受损。3.染铝大鼠血清ALT、AST活性显著高于对照组,TP、ALB、DBIL含量显著低于对照组,TBIL、TBA含量升高,染铝组与对照组相比差异显著,说明染铝可损伤大鼠肝细胞,导致肝脏代谢、吸收、分泌及蛋白合成功能受损。4.染铝大鼠肝脏及血清GSH-Px、SOD活力低于对照组,MDA含量高于对照组,组间差异显著,说明过量铝可诱导大鼠肝脏组织发生氧化应激,破坏机体抗氧化防御系统及清除自由基能力,造成大鼠肝脏组织氧化损伤。5.染铝大鼠肝脏组织中Al、Cu含量与对照组相比显著升高,Fe、Zn含量与对照组相比显著降低,表明长期染铝时,铝可在肝脏中蓄积,干扰肝中微量元素的代谢,引起肝内元素之间平衡失调,导致肝脏损伤。6.染铝大鼠肝脏凋亡指数明显升高,与对照组相比差异显著,肝脏抑凋亡基因Bcl-2蛋白及其mRNA表达量下降、促凋亡基因Bax蛋白及其mRNA表达量升高,组间差异显著,表明染铝可引起凋亡基因改变,诱导肝脏细胞凋亡。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 1. 引言
  • 1.1 铝的环境污染来源及机体内铝的来源
  • 1.1.1 铝的环境污染来源
  • 1.1.2 机体内铝的来源
  • 1.2 铝在动物体内的代谢
  • 1.3 染铝对肝脏的毒性作用
  • 1.3.1 染铝对肝脏结构及肝细胞超微结构的影响
  • 1.3.2 染铝对肝脏酶的影响
  • 1.3.3 染铝对肝脏代谢功能的影响
  • 1.3.4 染铝对肝脏脂质过氧作用的影响
  • 1.3.5 染铝对肝脏中铁、锌、铜元素的影响
  • 1.3.6 染铝对肝脏细胞凋亡的影响
  • 1.4 研究的目的和意义
  • 2. 材料与方法
  • 2.1 主要仪器和试剂
  • 2.1.1 主要仪器
  • 2.1.2 主要试剂
  • 2.2 动物模型的建立
  • 2.3 样品采集与处理
  • 2.4 检测项目和方法
  • 2.4.1 大鼠临床症状观察
  • 2.4.2 肝脏脏器系数测定
  • 2.4.3 显微和超微结构观察
  • 2.4.4 肝功能生化指标的检测
  • 2.4.5 血清和肝脏抗氧化功能的检测
  • 2.4.6 肝脏组织铝、铁、锌、铜含量的检测
  • 2.4.7 肝脏细胞凋亡指数的检测
  • 2.4.8 肝脏Bcl-2 和Bax 蛋白表达的检测
  • 2.4.9 肝脏Bcl-2 mRNA 和Bax mRNA 表达的检测
  • 2.5 试验数据的分析及统计
  • 3. 实验结果
  • 3.1 大鼠临床症状及体重检测结果
  • 3.2 肝脏脏器系数测定结果
  • 3.3 肝脏显微和超微结构观察结果
  • 3.4 肝功能生化指标检测结果
  • 3.4.1 血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性检测结果
  • 3.4.2 血清总蛋白和白蛋白含量检测结果
  • 3.4.3 血清总胆红素和直接胆红素含量检测结果
  • 3.4.4 血清胆汁酸含量检测结果
  • 3.5 血清和肝脏抗氧化功能检测结果
  • 3.5.1 血清、肝脏中GSH-Px 活性检测结果
  • 3.5.2 血清、肝脏中SOD 活性检测结果
  • 3.5.3 血清、肝脏中MDA 含量检测结果
  • 3.6 肝脏中铝、铁、锌、铜含量检测结果
  • 3.7 肝脏细胞凋亡指数检测结果
  • 3.8 肝脏Bcl-2、Bax 蛋白表达检测结果
  • 3.8.1 Bcl-2 蛋白表达结果
  • 3.8.2 Bax 蛋白表达结果
  • 3.9 肝脏细胞Bcl-2 mRNA 和Bax mRNA 相对表达量检测结果
  • 4. 讨论
  • 4.1 大鼠亚慢性染铝模型的建立
  • 4.2 染铝对大鼠生长发育的影响
  • 4.3 染铝对大鼠肝脏脏器系数的影响
  • 4.4 染铝对大鼠肝脏结构的影响
  • 4.5 染铝对大鼠肝功能生化指标的影响
  • 4.6 染铝对大鼠肝脏氧化与抗氧化功能的影响
  • 4.7 染铝对肝脏铁、锌、铜元素的影响
  • 4.8 染铝对肝细胞凋亡的影响
  • 5. 结论
  • 致谢
  • 参考文献
  • 附录:实验结果附图
  • 攻读硕士学位期间发表的学术论文
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