论文摘要
本研究旨在探讨日粮不同维生素A水平对感染伪狂犬病毒（Pseudorabies Virus,PRV）雄鼠繁殖性能的免疫保护效应。试验选用120只32日龄昆明一级雄鼠,按体重随机分配到8个组,其中5个为PRV攻毒组,饲喂日粮维生素A水平分别为0、4 000、10 000、25 000、50 000 IU/kg;3个为PBS对照组,饲喂日粮维生素A水平分别为0、4 000、10 000 IU/kg。饲喂试验日粮11周后攻毒,并分别在攻毒后的第7天和第14天收集样品,利用HPLC测定肝脏视黄醇含量;计算雄鼠死亡率、脏器系数、精子密度和精子畸形率;利用透射免疫比浊法测定血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）的浓度;利用ELISA法测定血清细胞因子（IL-1β、IFN-γ、IL-10）的浓度;利用RT-PCR方法检测目的基因Toll样受体3（Toll-like receptor3,TLR3）、Toll样受体7（Toll-like receptor7,TLR7）、Toll样受体9（Toll-like receptor9,TLR9）mRNA在睾丸中的表达量。结果表明:1、与对照组相比,感染PRV可降低雄鼠肝脏视黄醇含量。攻毒组第7、14天的雄鼠肝脏视黄醇含量随日粮维生素A水平提高而增加,0与4 000 IU/kg组间差异不显著（P＞0.05）,显著低于10 000、25 000和50 000IU/kg组（P＜0.05）,这三组随日粮维生素A水平的升高显著增加（P＜0.05）。2、攻毒组雄鼠的死亡率随日粮维生素A水平的升高而降低,0 IU/kg组雄鼠的死亡率最高（达37.5%）,25 000和50 000IU/kg组死亡率降为18.8%,但差异不显著（P＞0.05）。3、与对照组相比,感染PRV可显著降低雄鼠精子密度和提高精子畸形率（P＜0.05）,但对脏器系数没有影响（P＞0.05）。日粮维生素A水平对攻毒组雄鼠精子密度、脏器系数和精子畸形率有影响,攻毒组第7、14天,10 000、25 000和50 000IU/kg组间精子密度、脏器系数差异不显著（P＞0.05）,显著高于0 IU/kg组（P＜0.05）;0和4 000 IU/kg组精子畸形率差异不显著（P＞0.05）,显著低于其它各组（P＜0.05）,其中25 000和50 000IU/kg组差异不显著（P＞0.05）。回归分析表明:攻毒后第7天,获得最高精子密度和最低精子畸形率的维生素A添加水平分别为45 000和32 500IU/kg;攻毒后第14天,获得最高精子密度和最低精子畸形率的维生素A添加水平分别为40 000和31 250 IU/kg。4、与对照组相比,感染PRV显著提高血清IL-1β、IFN-γ的浓度（P＜0.05）,但对IL-10浓度无影响（P＞0.05）。日粮维生素A水平对攻毒组的血清IL-1β、IFN-γ和IL-10的浓度有影响,攻毒后第7、14天,10 000、25 000和50 000IU/kg组血清IL-1β、IFN-γ的浓度显著低于0 IU/kg组（P＜0.05）,其中50 000IU/kg组显著低于10 000IU/kg组;但对血清IL-10的影响则相反（P＜0.05）。5、与对照组相比,感染PRV显著增加雄鼠血清IgG、IgA浓度（P＜0.05）,但对IgM浓度的影响不显著（P＞0.05）。日粮维生素A水平对攻毒组的血清IgG、IgA、IgM的浓度有影响,攻毒后第7、14天,0 IU/kg组显著低于其它各组（P＜0.05）,之后随日粮维生素A水平升高显著升高（P＜0.05）,在25 000和50 000 IU/kg组差异不显著（P＞0.05）,50 000 IU/kg组显著高于4 000 IU/kg组（P＜0.05）。6、与对照组相比,感染PRV可显著提高雄鼠睾丸TLR3、TLR7、TLR9 mRNA的表达量（P＜0.05）。提高日粮维生素A水平可降低攻毒组雄鼠睾丸TLR3、TLR7、TLR9 mRNA表达量,攻毒后第7和第14天,10 000、25 000和50 000IU/kg组显著低于0 IU/kg组（P＜0.05）,其中25 000、50 000 IU/kg组显著低于10 000IU/kg组（P＜0.05）。结论:1、维生素A临界缺乏降低雄鼠的免疫功能和繁殖性能,感染PRV可降低肝脏视黄醇含量和精子密度,提高雄鼠的死亡率和精子畸形率。2、病毒感染情况下,保证雄性动物繁殖性能的维生素A需要量显著高于正常需要量。3、提高日粮维生素A水平可增加血清免疫球蛋白的含量,增强感染PRV雄鼠的体液免疫能力。4、提高日粮维生素A水平可降低血清炎症细胞因子的浓度,从而下调感染PRV雄鼠睾丸TLR的表达,降低睾丸内炎症因子的浓度,有利于精子质量的提高。