论文摘要
目的探讨白藜芦醇（Resveratrol,Res）对高糖环境人脐静脉内皮细胞氧化损伤的保护作用。方法人脐静脉内皮细胞株（ECV304）体外培养24h贴壁后随机分为正常对照（NG,葡萄糖浓度5.6mmol/L）组、高糖（HG,葡萄糖浓度30mmol/L）组,白藜芦醇(NG+Res10-3mol/L-10-5mol/L)组、高糖+白藜芦醇(HG+Res10-3mol/L-10-5mol/L)组。NG组、HG组培养24、48和72h检测细胞增殖,培养液中一氧化氮（NO）,内皮素-1（ET-1）,细胞间粘附分子-1（ICAM-1）浓度;NG+Res10-3mol/L-10-5mol/L组和HG+Res10-3mol/L-10-5mol/L组培养48h检测细胞增殖、NO浓度;HG+Res10-4mol/L组培养48h检测ET-1、ICAM-1浓度。NG组、HG组、HG+Res10-4mol/L组48h检测人脐静脉内皮细胞胞浆中超氧化物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力（TAC）、一氧化氮合酶（NOS）、可诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、丙二醛（MDA）的含量,用RT-PCR法检测NF-κB65和iNOS mRNA表达,Western-blot法检测NF-κB65蛋白质表达。结果1.与NG组比较,HG组48h,72hMTT值明显减低（P＜0.01,P＜0.05）,NG+Res各组与NG组MTT值相近,HG+Res10-4mol/L-10-5mol/L组MTT值高于HG组（P＜0.01）,低于NG和NG+Res10-4mol/L-10-5mol/L组,HG+Res10-4mol/L组MTT值高于HG+Res10-5mol/L。2.HG组比NG组NO、ET-1、ICAM-1明显升高（P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01）,HG+Res组较HG组均显著下降（P＜0.01）,ET-1接近NG组,ICAM-1仍高于NG组（P＜0.01）。3.与NG组比较,HG组SOD活性,TAC能力明显降低（P＜0.01）,MDA升高（P＜0.05）;HG+Res组明显升高SOD活性和TAC能力升高（P＜0.05）,降低MDA（P＜0.01）,SOD,TAC仍低于NG组（P＜0.05）,MDA接近NG组。4.与NG组比较,HG组NOS、iNOS、eNOS升高（P＜0.01,P＜0.05,P＜0.01）,HG+Res组明显降低NOS、iNOS、eNOS降低（P＜0.01,P＜0.05,P＜0.01）,NOS,eNOS接近NG组,iNOS高于NG组（P＜0.05）。5.HG组上调NF-κB65mRNA和蛋白质表达,iNOSmRNA表达（P＜0.01）,HG+Res组能下调两者表达（P＜0.01）,仍高于NG组（P＜0.05）。用Spearman相关性分析NF-κB65与iNOSmRNA表达变化呈正相关（r=0.554,P＜0.01）;NF-κB65与ICAM-1正相关（r=0.356,P＜0.01）。结论1.白藜芦醇可以改善高葡萄糖抑制人脐静脉内皮细胞的增殖作用,对正常内皮细胞无促增殖作用。2.白藜芦醇在体外改善高葡萄糖所致人脐静脉内皮细胞的氧化应激状态,可下调高葡萄糖引起的NF-κB65与iNOS的高表达,减少ICAM-1和ET-1的产生,调节NO,有助于防止对人脐静脉内皮细胞的氧化损伤。
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