Braintone对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其对缺氧信号转导通路的影响

论文摘要

目的:观察Braintone预防给药对大鼠局灶性脑缺血的保护作用及其对缺氧信号转导通路的影响。方法:采用大鼠永久性大脑中动脉阻塞（permanent middle cerebral artery occlusion, pMCAO）模型观察Braintone 87.5mg/kg、175mg/kg、350mg/kg对脑梗死体积、脑水肿、行为学症状及皮层脑血流的影响。采用Real time PCR技术检测HIF-1α、ΙΝΟS、VEGF mRNA的表达;应用免疫组织化学法及Western-blot法检测HUVEC缺氧后HIF-1α、ΙΝΟS、ΗΟ?1蛋白水平的时程变化。结果:模型组动物较假手术组动物出现明显的缺血性神经损伤体征,脑血流量较术前明显减少。Braintone 87.5、175、350mg/kg,呈剂量依赖性减少pMCAO大鼠脑梗死体积,降低脑含水量和改善行为学体征,（P <0.05,P <0.01）其中Braintone 175mg/kg、350mg/kg可增加大鼠的基础脑血流量及pMCAO后大鼠缺血部位的脑血流量（P <0.05,P <0.01）。Braintone含药血清对缺氧损伤的HUVEC细胞,可提高细胞存活率（P <0.05）。Real time PCR结果表明:HUVEC细胞缺氧3h,HIF-1α、INOS mRNA出现表达高峰（P <0.01）;VEGF mRNA表达高峰则出现在缺氧后6h（P <0.01）,Braintone含药血清能显著上调HIF-1α、INOS、VEGF mRNA的表达（P <0.05,P <0.01）。免疫荧光法证明对照组HUVEC细胞HIF-1α、INOS、HO-1主要表达在胞浆中,HUVEC细胞缺氧后12h,HIF-1α、INOS、HO-1阳性细胞显著增多（P <0.01）,主要表达在胞核;Braintone含药血清能显著增强HIF-1α、INOS、HO-1蛋白表达量,促进核转位（P <0.05,P <0.01）。Western-blot显示:HUVEC细胞缺氧后,HIF-1α、INOS蛋白水平明显增加,12h达高峰（P <0.01）,Braintone含药血清能显著增加HIF-1α、INOS的蛋白含量（P <0.05）。结论:Braintone对大鼠局灶性脑缺血有明显保护作用,其作用机制可能与增加脑血流量,上调HIF-1α,INOS, HO-1, VEGF信号转导通路有关。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 前言
• 一、本课题研究的理论基础及国内外研究现状
• 二、本课题的研究意义及价值
• 第一部分 Braintone 对大鼠局灶性脑缺血的保护作用
• 材料与方法
• 结果
• 小结
• 第二部分 Braintone 含药血清对人脐静脉内皮细胞 （HUVEC）缺氧缺糖（OGD）损伤 的保护作用及其分子机制
• 一、Braintone 含药血清对HUVEC 细胞OGD 损伤的保护作用
• 材料与方法
• 结果
• 二、Braintone 含药血清对 HUVEC 细胞 OGD 后 HIF-1αmRNA, INOSmRNA, VEGFmRNA 的表达变化
• 材料与方法
• 结果
• 三、Braintone 含药血清对 HUVEC 细胞 OGD 后 HIF-1α, Ι?ΝΟS, VEGF 蛋白表 达的影响
• 材料与方法
• 结果
• 四、Braintone 含药血清对 HUVEC 细胞 OGD 后 HIF-1α, ΙΝΟS, ΗΟ?1 蛋白水 平的变化
• 材料与方法
• 结果
• 五、小结
• 讨论
• 一.大鼠 pMCAO 模型的制备及 Braintone 对大鼠局灶性脑缺血的保护作用
• 二. Braintone 含药血清对 HUVEC 细胞缺氧缺糖（OGD）损伤的保护作用及 其分子机制
• 结论
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的论文
• 附录一 综述
• 附录二 论文
• 附录三 英文缩写词表
• 谢忱